纈沙坦對人冠狀動脈內(nèi)皮細胞內(nèi)皮素含量的影響.pdf

1、目的：體外培養(yǎng)成人冠狀動脈內(nèi)皮細胞；研究纈沙坦(valsartan)和/或血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)對體外培養(yǎng)的成人冠狀動脈內(nèi)皮細胞內(nèi)皮素(endothelin)含量的影響。 方法：對急死病人的前降支采用膠原酶消化法結(jié)合機械法獲得內(nèi)皮細胞，用含胎牛血清(FBS)的Dulbecco的改良的Eagle培養(yǎng)液(DMEM)培養(yǎng)細胞并傳代，將第二代傳代細胞凍存?zhèn)溆谩吞K上述凍存的細胞，并將其接種于6孔細胞培養(yǎng)板中，待第三代傳代細胞生長達培養(yǎng)

2、板表面60％時加入藥物，藥物分為對照組、纈沙坦組(濃度為10μmol/l)組、AngⅡ(濃度為10μmol/l)組和AngⅡ(濃度為10μmol/l)加3種不同濃度(0.1、1.0、10μmol/l)纈沙坦組，先加入纈沙坦預作用半小時，再加入AngⅡ，培養(yǎng)36小時后檢測內(nèi)皮素的含量。 結(jié)果：細胞培養(yǎng)結(jié)果：原代培養(yǎng)的細胞24小時貼壁率為30～40％，培養(yǎng)兩天后鏡下見內(nèi)皮細胞生長，培養(yǎng)5天細胞數(shù)量明顯增加，可達培養(yǎng)表面的40％左右，

3、突起縮短，胞體連接緊密，培養(yǎng)7天，鏡下可見細胞呈大片克隆狀，細胞間界限不清。10天后血管內(nèi)皮細胞基本呈單層狀，緊密排列。傳代細胞多為多角形，邊界清楚，生長活躍，符合血管內(nèi)皮細胞生物學特性。藥物試驗結(jié)果：AngⅡ組的內(nèi)皮素含量明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.0000)；在纈沙坦組和對照組之間的差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)；AngⅡ組的內(nèi)皮素含量高于AngⅡ+0.1I.tmol/1纈沙坦組，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.0000

4、)； AngII組的內(nèi)皮素含量高于AngⅡ+1μmol/l纈沙坦組，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.0000)；AngII組的內(nèi)皮素含量高于AngⅡ+10μmol/l纈沙坦組，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.0000)；AngII+0.1μmol/l纈沙坦組的內(nèi)皮素含量高于AngⅡ+1.0μmol/l纈沙坦組，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.0000)；AngⅡ+1μmol/l纈沙坦組的內(nèi)皮素含量高于AngⅡ+10μmol/l纈沙坦組，差異有統(tǒng)計學意義(