HIV-1假病毒系統(tǒng)的構(gòu)建及應(yīng)用.pdf

1、HIV自1981年被發(fā)現(xiàn)以來(lái)，已經(jīng)在全世界范圍內(nèi)擴(kuò)散，對(duì)人類健康造成了極大的危害。目前，人們?nèi)匀粵](méi)有找到徹底清除HIV的有效途徑。這是由于HIV具有極高的突變能力，能夠逃脫機(jī)體的體液免疫應(yīng)答機(jī)制，長(zhǎng)期潛伏在人體內(nèi)。這是消滅HIV最大的難點(diǎn)。因此，加強(qiáng)對(duì)HIV的研究具有重要意義。
　　 常規(guī)的針對(duì)HIV的研究往往需要用到具有高危險(xiǎn)性的HIV真病毒，因此對(duì)實(shí)驗(yàn)的硬件條件及實(shí)驗(yàn)技能要求較高，不利于大規(guī)模應(yīng)用。而HIV假病毒由于只能進(jìn)行

2、一次感染，具有較高的生物安全性，對(duì)實(shí)驗(yàn)的硬件要求較低，可以替代HIV真病毒在HIV相關(guān)領(lǐng)域研究中的作用。
　　 本研究通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)室保有的16株HIV-1病毒株的env序列進(jìn)行克隆構(gòu)建，成功構(gòu)建了16個(gè)能夠正確表達(dá)相應(yīng)HIV包膜蛋白的env表達(dá)克隆。利用四質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的方法包裝HIV-1假病毒。本研究中用于包裝HIV-1假病毒的報(bào)告基因有GFP、RFP、β-gal和luciferase四種，每種報(bào)告基因有相對(duì)應(yīng)的檢測(cè)儀器和方法。結(jié)果

3、表明，16株分別攜帶四種不同報(bào)告基因的HIV-1假病毒都可以通過(guò)四質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的方法包裝出來(lái)，但滴度普遍較低，需要通過(guò)濃縮等手段加以提高。
　　 HIV中和抗體在預(yù)防和控制HIV的感染及疫苗的設(shè)計(jì)等方面均有重要作用。利用HIV假病毒系統(tǒng)可以對(duì)HIV中和抗體的廣譜中和能力進(jìn)行系統(tǒng)的評(píng)價(jià)。在本研究中驗(yàn)證了構(gòu)建的HIV-1假病毒系統(tǒng)可以應(yīng)用于評(píng)價(jià)HIV-1中和抗體的中和能力及交叉反應(yīng)強(qiáng)弱，對(duì)于HIV-1中和抗體性質(zhì)的研究具有重要作用，為