蓮房原花青素對口腔癌的藥理作用及其機制研究.pdf

1、縮略語表縮寫名LSPCMTXKBL929MTT中文名蓮房原花青素甲氨蝶吟人口腔表皮樣癌小鼠成纖維細胞二甲基噬哇二苯基四哇澳鹽HETEMFCMFITCCDMDAGSHPXTSOD英文全名ProcyanidinsofLotusSee即odMethotrexateHumanepidermoidcarcinomaMousefibrosarcomacell3(45dimethylthiazol2yl)25diphenyltetrazoliumbr

2、omideHematoxylinEosinTransmissionelectronmicroscopyFlowcytometryPropidiumiodineFluoresceinisomerthiocyanateCadherins910dimethyl12benzanthraceneMaleicDialdehydeGlutathioneperoxidaseTotalSuperoxidedismutase蘇木精一伊紅透射電鏡流式細胞術(shù)碘

3、化丙陡異硫氰酸熒光素鈣豁附素二甲基苯花蕙丙二醛谷朧甘膚過氧化物酶總超氧化物歧化酶蓮房原花青素對口腔癌的藥理作用及其機制研究生長，但在100300tgmL時不影響其生長，而在50PgmL時又顯著的抑制了其生長，提示LSPC對癌細胞的毒作用和對正常細胞的保護作用有一個最佳的劑量范圍。綜合兩者，可得LSPC對KB細胞最佳作用濃度為2004001xgmL.2.LSPC對KB細胞形態(tài)的影響采用相差顯微鏡、HE常規(guī)染色光學顯微鏡和透射電鏡觀察了LS

4、PC對KB細胞作用引起的形態(tài)變化。用不同濃度的LSPC作用KB細胞后，相差顯微鏡下可見細胞變圓、變小，細胞膜透亮，細胞漂浮，表明細胞分裂減少，生長受到抑制。HE常規(guī)染色光鏡下可見細胞核向細胞膜邊集、突出，細胞皺縮、變圓、變小，出現(xiàn)碎核，表明LSPC對KB細胞有細胞毒作用，且細胞呈現(xiàn)凋亡現(xiàn)象。透射電鏡下可見橋粒結(jié)構(gòu)消失，細胞萎縮，胞內(nèi)出現(xiàn)大量的空泡，染色質(zhì)邊集，斷裂等，出現(xiàn)凋亡的典型特征。以上三者結(jié)果均表明，LSPC可顯著的抑制KB細胞的

5、生長、改變KB細胞形態(tài)，并誘導KB細胞凋亡。3.LSPC誘導KB細胞凋亡作用研究運用流式細胞儀，采用PI染色法和FITCannexinVPI法，觀察不同濃度LSPC誘導KB細胞凋亡作用，并通過檢測KB細胞表面蛋白CD95表達量探討LSPC誘導KB細胞凋亡途徑。PI染色法結(jié)果顯示，LSPC濃度在20即gmL300tgmL40即gmL時，分別有7.5%8.3%17.5%KB細胞處于凋亡后期或己經(jīng)壞死或是兩者的混合FITCannexinVPI

6、法結(jié)果顯示，當LSPC濃度在200ugmL時，部分KB細胞處于凋亡早期，而LSPC濃度在300ggmL400pgML時，部分KB細胞處于凋亡后期或己經(jīng)壞死或兩者皆有。表明LSPC可誘導KB細胞凋亡，同時也可引起KB細胞壞死，且呈劑量效應關系.但隨著LSPC濃度的增加，CD95蛋白表達量呈下降趨勢，即KB細胞可由Fas途徑引起凋亡的細胞數(shù)減少，與LSPC可誘導KB細胞凋亡作用結(jié)果不一致。這可能是LSPC與細胞表面蛋白CD95結(jié)合，從而阻礙