異基因造血干細胞移植后CMV感染相關因素及CMV特異性T細胞過繼免疫治療的探討.pdf

1、第一部分:異基因造血干細胞移植后CMV感染臨床分析
　　目的：探討異基因造血干細胞移植(allogeneic hematopoietic stem celltransplantation，allo-HSCT)后巨細胞病毒(cytomegalovirus，CMV)感染的相關因素。
　　方法：2011年1月至2013年12月蘇大附一院血液科接受異基因造血干細胞移植的769例患者，通過定量PCR方法檢測CMV-DNA水平，免疫熒光

2、染色白細胞PP65抗原兩種檢測方法診斷CMV感染，回顧性分析符合CMV感染259例臨床資料。
　　結(jié)果：769例患者男、女性CMV感染率分別為34.24％、32.93％(P＞0.05)。將年齡按成年18歲進行分層:小于18歲及大于18歲CMV感染率分別為35％、33.3％(P＞0.05)，性別及移植年齡在發(fā)生CMV感染無統(tǒng)計學差異;將同胞全相合、無關供體、單倍體造血干細胞移植進行比較，陽性率分別為24.39％、38.07％、53.

3、29％(P＜0.01)。2012年起應用更昔洛韋、膦甲酸進行預防性抗病毒治療，比較三年間allo-HSCT的CMV感染率2011年56.12％、2012年26.86％、2013年29.0％，2012年-2013年對比明顯低于2011年CMV感染發(fā)生率(P＜0.01)。采取與未采取預防性抗CMV病毒治療對比首次出現(xiàn)CMV感染時間有明顯差異(P＜0.01)。CMV-DNA定量及CMV-PP65兩種檢測手段，均與CMV疾病發(fā)生相關，CMV疾病

4、發(fā)生率隨CMV-DNA病毒載量增加而增加，發(fā)生CMV疾病與CMV感染持續(xù)時間無顯著相關，早期CMV感染出現(xiàn)CMV疾病高于晚期CMV感染。將發(fā)生CMV感染與出現(xiàn)不同程度aGVHD進行分析:0-Ⅰ度aGVHD出現(xiàn)CMV感染率為19.5％，Ⅱ-Ⅳ度aGVHD出現(xiàn)CMV感染率為57.2％(P＜0.01)。將激素用量統(tǒng)一換算為甲潑尼龍(methylprednisolone，MP)，進行分析發(fā)現(xiàn):大于及等于MP2mg/kg的CMV陽性率為63.79

5、％，低于MP2mg/kg為20.67％，(P＜0.01)。CMV檢測陽性、陰性出現(xiàn)HC的比例分別為72.5％、12.16％(P＜0.01)。
　　結(jié)論：大劑量激素的應用及aGVHD是CMV感染的危險因素。供體性別及年齡不是CMV感染相關因素。無關供體及單倍體造血干細胞移植發(fā)生CMV感染的機率高于同胞全相合造血干細胞移植方式，對于存在高危因素預防性抗CMV病毒藥物的應用減少了移植早期發(fā)生CMV感染的風險，值得推薦。CMV-PP65、

6、CMV-DNA檢測結(jié)果陽性與CMV疾病相關，CMV-DNA病毒載量越高發(fā)生CMV疾病風險越大，CMV疾病與CMV感染持續(xù)時間不相關。早期CMV感染與HC相關。
　　第二部分:異基因造血干細胞移植后CMV重激活與閉塞性細支氣管炎綜合征相關性探討
　　目的：探討異基因造血干細胞移植（allogeneic hematopoietic stem celltransplantation，allo-HSCT）術后CMV感染與閉塞性細支氣

7、管炎綜合征(bronchiolitisobliterans syndrome，BOS)的相互關系。方法：2011年1月至2013年12月蘇大附一院血液科行異基因造血干細胞移植的769例患者，通過熒光定量PCR方法檢測CMV-DNA水平，免疫熒光染色白細胞PP65抗原血癥兩種檢測方法診斷CMV感染，將CMV感染及未發(fā)生CMV感染患者出現(xiàn)BOS進行對照分析，判斷CMV感染是否與BOS相關，對確診CMV感染患者進行分組，出現(xiàn)BOS與未出現(xiàn)BO

8、S兩組的臨床資料進行對照分析。結(jié)果：確診CMV感染與未感染CMV患者BOS發(fā)生率分別為12.35％及1.56％(P＜0.01)。CMV感染者發(fā)生BOS顯著高于非CMV感染者。在CMV-DNA定量及CMV陽性持續(xù)時間兩個單因素分析，發(fā)生BOS與CMV感染陽性持續(xù)時間，不相關(P＞0.05)。將進行分層統(tǒng)計，CMV-DNA載量在105水平發(fā)生BOS有統(tǒng)計學差異(P＜0.01)，發(fā)生BOS與CMV感染發(fā)生次數(shù)相關，CMV感染后出現(xiàn)再激活發(fā)生B

9、OS，較初次CMV感染BOS發(fā)生率顯著升高(P＜0.01)。出現(xiàn)CMV相關疾病發(fā)生BOS率增高，發(fā)生CMV疾病較未CMV疾病者發(fā)生BOS有顯著差異(P＜0.01)。結(jié)論：allo-HSCT后導致BOS的危險因素中，CMV重激活和CMV疾病是值得注意的危險的相關因素。移植后一旦確診CMV感染，應足量足療程的應用，減少CMV感染的重激活及BOS的發(fā)生。
　　第三部分:CMV特異性T細胞過繼免疫治療在異基因造血干細胞移植后CMV感染中的

10、應用
　　目的：探討CMV特異性T細胞過繼免疫治療應用于異基因造血干細胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation，allo-HSCT)后難治性巨細胞病毒(cytomegalovirus，CMV)感染。方法：選擇allo-HSCT后CMV感染患者1例，為雙份臍帶血造血干細胞移植后，持續(xù)CMV重激活對更昔洛韋、磷甲酸鈉、西多福韋、CMV特異性免疫球蛋白均無效，分析T細胞

11、亞群，存在T細胞過度受抑，患者父親檢測CMV-IgG抗體陽性，抽取患者父親外周淋巴細胞，應用免疫磁珠進行CMV特異性T細胞分選，輸注給患者行HLA部分相合CMV特異性T細胞治療。結(jié)果：輸注前CMV-DNA為105 copies/ml，輸注后CMV-DNA降至103copies/ml，CMV感染相關發(fā)熱癥狀控制。輸注后并未出現(xiàn)誘發(fā)GVHD，及輸注反應。結(jié)論：CMV特異性T細胞過繼免疫治療是allo-HSCT后難治性CMV感染的新的治療措施