Sox9介導(dǎo)Wnt-β-catenin信號通路影響皮膚鱗癌細(xì)胞增殖的機(jī)制.pdf

1、目的:
　　探討β-連環(huán)蛋白(β-catenin)和Sox9(sex determining region Y-box9)對鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞增殖的影響及作用機(jī)制。
　　方法:
　　1. 人皮膚鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系SCC12細(xì)胞，傳代培養(yǎng)用于實(shí)驗研究。合成腺病毒載體，實(shí)驗組為腺病毒介導(dǎo)的miRNA轉(zhuǎn)染組，對照組為空載組。轉(zhuǎn)染后測定轉(zhuǎn)染效率。
　　2. 通過免疫印跡法(Western Blotting)檢測腺病毒轉(zhuǎn)染后β-

2、catenin的表達(dá)。集落形成分析(Colony Forming Assay)觀察腺病毒介導(dǎo)的miRNA沉默β-catenin后SCC12細(xì)胞的增殖情況。
　　3. 免疫印跡法檢測腺病毒介導(dǎo)的miRNA沉默β-catemn后Sox9的表達(dá)情況。
　　4. 集落形成分析觀察腺病毒介導(dǎo)的miRNA沉默Sox9后SCC12細(xì)胞的增殖情況。
　　5. 腺病毒介導(dǎo)的miRNA沉默β-catenin后應(yīng)用腺病毒介導(dǎo)的Sox9過表達(dá)

3、Sox9，通過集落形成分析探討在鱗狀細(xì)胞癌中β-catenin和Sox9的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　1. 沉默β-catenin基因的SCC12細(xì)胞增殖明顯減少，與Scr對照組相比具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　2. SCC12細(xì)胞中，應(yīng)用腺病毒介導(dǎo)的miRNA沉默β-catenin，Sox9基因的表達(dá)明顯減少。
　　3. 轉(zhuǎn)染Ad/miR-Sox9沉默Sox9基因的表達(dá)，明顯抑制SCC12細(xì)胞的增殖，與Sc

4、r對照組相比具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　4. 沉默β-catenin基因的SCC12細(xì)胞中同時過表達(dá)Sox9基因，SCC12細(xì)胞的增殖部分恢復(fù)，與對照組相比具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　應(yīng)用Ad/miR-β-catenin轉(zhuǎn)染皮膚鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞SCC12后，SCC12細(xì)胞的增殖受到抑制。我們的研究結(jié)果表明，Sox9基因是被β-catenin調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)錄因子，并且Sox9基因促進(jìn)SCC12細(xì)胞