體外激活的小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞的作用研究.pdf

1、目的：1.建立和完善大鼠腦皮質(zhì)小膠質(zhì)細(xì)胞原代培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)方法和條件；2.探索原代培養(yǎng)的小膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)脂多糖(LPS)體外激活后對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞的影響；3.通過(guò)丁基苯酞(NBP)對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞激活過(guò)程的影響,探討國(guó)家Ⅰ類新藥NBP可能的新的作用靶點(diǎn)。
　　 方法：原代培養(yǎng)大鼠腦皮質(zhì)小膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元細(xì)胞；利用LPS刺激小膠質(zhì)細(xì)胞,建立原代培養(yǎng)的小膠質(zhì)細(xì)胞體外激活的細(xì)胞模型；提取LPS激活的小膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)基上清液作用于神經(jīng)元細(xì)胞,通過(guò)四甲基

2、偶氮唑鹽(MTT)檢測(cè)神經(jīng)元細(xì)胞的存活率；在加入LPS作用前用NBP處理小膠質(zhì)細(xì)胞,通過(guò)觀察小膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài),ELISA法定量檢測(cè)炎性因子IL-1β、TNF—α及IL-10的釋放,硝酸還原法檢測(cè)炎性介質(zhì)一氧化氮(NO),以及MTT檢測(cè)神經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)其培養(yǎng)基上清液作用后的存活率,綜合評(píng)估NBP對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞激活的影響。
　　 結(jié)果：成功培養(yǎng)出數(shù)量多、純度高的大鼠腦皮質(zhì)小膠質(zhì)細(xì)胞；LPS激活的小膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)基上清液可致神經(jīng)元細(xì)胞的存活