體外激活的小膠質(zhì)細胞對神經(jīng)元細胞的作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：1.建立和完善大鼠腦皮質(zhì)小膠質(zhì)細胞原代培養(yǎng)的實驗方法和條件；2.探索原代培養(yǎng)的小膠質(zhì)細胞經(jīng)脂多糖(LPS)體外激活后對神經(jīng)元細胞的影響；3.通過丁基苯酞(NBP)對小膠質(zhì)細胞激活過程的影響,探討國家Ⅰ類新藥NBP可能的新的作用靶點。
　　 方法：原代培養(yǎng)大鼠腦皮質(zhì)小膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元細胞；利用LPS刺激小膠質(zhì)細胞,建立原代培養(yǎng)的小膠質(zhì)細胞體外激活的細胞模型；提取LPS激活的小膠質(zhì)細胞的培養(yǎng)基上清液作用于神經(jīng)元細胞,通過四甲基

2、偶氮唑鹽(MTT)檢測神經(jīng)元細胞的存活率；在加入LPS作用前用NBP處理小膠質(zhì)細胞,通過觀察小膠質(zhì)細胞的形態(tài),ELISA法定量檢測炎性因子IL-1β、TNF—α及IL-10的釋放,硝酸還原法檢測炎性介質(zhì)一氧化氮(NO),以及MTT檢測神經(jīng)元細胞經(jīng)其培養(yǎng)基上清液作用后的存活率,綜合評估NBP對小膠質(zhì)細胞激活的影響。
　　 結(jié)果：成功培養(yǎng)出數(shù)量多、純度高的大鼠腦皮質(zhì)小膠質(zhì)細胞；LPS激活的小膠質(zhì)細胞的培養(yǎng)基上清液可致神經(jīng)元細胞的存活

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