血漿游離DNA在遺傳病和腫瘤診斷中的應(yīng)用.pdf_第1頁(yè)
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1、第一部分檢測(cè)血漿TPEF基因甲基化異常診斷大腸癌 目的:分析中國(guó)大腸癌患者TPEF基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài),建立檢測(cè)腫瘤患者外周血血漿中TPEF基因異常甲基化的方法,探討早期非損傷性診斷大腸癌的可行性。 方法:提取大腸癌患者組織及外周血血漿DNA,并采用甲基化特異性PCR技術(shù)分析TPEF基因甲基化狀態(tài)。 結(jié)果:32例大腸癌手術(shù)切除標(biāo)本中,24例檢測(cè)到TPEF基因甲基化,陽(yáng)性率為75.0%(24/32):對(duì)應(yīng)的陽(yáng)性標(biāo)

2、本中,22例血漿中亦檢測(cè)到甲基化異常,血漿檢出率為68.8%(22/32)。 結(jié)論:大腸癌患者外周血血漿DNA中TPEF基因甲基化為一頻繁事件,可望成為腫瘤早期診斷的一個(gè)標(biāo)志物。 第二部分檢測(cè)孕婦.fill.漿DNA非損傷性產(chǎn)前診斷胎兒性別 目的:建立一種可靠性強(qiáng)的非創(chuàng)傷性鑒別胎兒性別的方法。 方法:根據(jù)Amelogenin基因第3內(nèi)含子在X-Y染色體上6bp的差異,設(shè)計(jì)了兩種方法,應(yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增孕婦

3、血漿游離DNA,凝膠電泳鑒定其基因型,從而判斷胎兒性別。 結(jié)果:應(yīng)用方法1檢測(cè)了32例妊娠7-20周的孕婦血漿DNA樣本,所得結(jié)果與產(chǎn)后胎兒實(shí)際性別相比較,符合率96.88%。應(yīng)用方法2檢測(cè)了32例妊娠7-13周的孕婦血漿DNA樣本,并將檢測(cè)結(jié)果與胎兒出生后實(shí)際性別相比較。結(jié)果僅發(fā)現(xiàn)2例假陽(yáng)性,未發(fā)現(xiàn)假陰性,檢出符合率為93.8%。 結(jié)論:通過(guò)檢測(cè)孕婦血漿DNAAmelogenin基因6bp差異產(chǎn)前診斷胎兒性別方法可行,

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