兔蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦組織微循環(huán)灌注與凋亡相關(guān)基因Bax、Bcl-2表達及微血管密度關(guān)系的研究.pdf

1、目的通過檢測兔實驗性蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦組織微循環(huán)灌注、凋亡相關(guān)基因Bax、Bc卜2的表達、微血管密度的動態(tài)變化，探討腦組織微循環(huán)灌注與凋亡相關(guān)基因Bax、Bcl-2的表達及微血管密度之間的關(guān)系。材料與方法45只新西蘭大白兔隨機分為3組：A組(正常對照組，n=5)，B組(SAH組，n=20)，C組(假手術(shù)對照組，n=20)，B、C兩組動物再隨機分為第1d、3d、5d、7d，4個亞組，每組5只動物。首先制作兔枕大池二次注血或注生理鹽水模型，

2、接著分別于二次注血或注生理鹽水后，第1、3、5、7天行常規(guī)CT灌注掃描。A組動物CT灌注掃描結(jié)束后，B、C組動物于二次注血或注生理鹽水后第1、3、5、7天成像結(jié)束后，立即灌注取腦，標(biāo)本送常規(guī)病理及電鏡觀察。最后應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測SAH后不同時間Bcl-2、Bax和CD34的表達。結(jié)果SAH后動物進食量下降、神經(jīng)功能障礙，基底動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞胞核染色質(zhì)邊聚，內(nèi)皮細(xì)胞間緊密連接增寬；平滑肌細(xì)胞空泡變；毛細(xì)血管管腔狹窄，血管周圍間質(zhì)水腫

3、；神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞水腫，線粒體空泡變。CBF于SAH后d1、d3、d5、d7均有所降低，以第d3下降明顯(與對照組及假手術(shù)組比較有顯著統(tǒng)計學(xué)意義，P<0．05)；CBV于SAH后dl略有升高，d3、d5、d7降致正常值以下，以d5下降最為明顯(與對照組及假手術(shù)組比較有顯著統(tǒng)計學(xué)意義，P<0．05)；MTT于SAH后dl有所延長，d3、d5、d7降致正常值以下，但與對照組及假手術(shù)組比較各組均無顯著統(tǒng)計學(xué)意義；Bcl-2蛋白表達于SAH后dl明

4、顯增強達到高峰，但隨后d3、d5、d7降低，與對照組及假手術(shù)組比較各組均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．05)；Bax表達于SAH后dl、d3逐漸升高達到高峰；在d5、d7逐漸降低，但其表達仍維持在較高水平，與對照組及假手術(shù)組比較各組均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．05)；CD34+表達毛細(xì)血管數(shù)目于SAH后d1、d3、d5逐漸增多，以d5CD34+表達最為明顯，d7較d5有所降低，但表達仍維持在較高水平，與對照組及假手術(shù)組比較各組均有顯著統(tǒng)計學(xué)

5、意義(P<0．05)；SAH后CBF、CBV、MTT變化與Bax、Bcl-2、CD34變化無明顯相關(guān)性；CBF變化與Bcl-2／Bax變化正相關(guān)(r=0．356，P<0．05)。結(jié)論1．枕大池二次注血法制作的兔SAH模型，動物死亡率低，基底動脈、毛細(xì)血管、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞可產(chǎn)生明顯的病理改變，是一種穩(wěn)定易得的理想模型；2．SAH后CBF變化與Bcl-2／Bax變化正相關(guān)，CBF可能作為的監(jiān)測SAH后缺血性腦損傷程度的有效指標(biāo)；3．兔實驗性蛛