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文檔簡介
1、本課題通過問卷調查收集了此次腦膜炎爆發(fā)的基本資料，總結了流行概況。為明確病因，采集了204份來自于204例臨床確診為無菌性腦膜炎患者的腦脊液(CSF，cerebrospinalfluid)標本，以及4份采自另外4例患者的糞便標本。采用細胞培養(yǎng)法進行病原分離。第一階段病原分離在傳代細胞系Vero(非洲綠猴腎細胞)和HEp-2(人喉癌細胞)中進行，204份CSF無一例引起陽性細胞病變(CPE，cytophathiceffect)；繼而先后引
2、入兩種來源于人體胚胎的細胞系MRC-5(人胚肺細胞)和293(人胚腎細胞)進行第二階段的病原分離，結果發(fā)現(xiàn)66份接種于MRC-5細胞系的CSF中有18份產生了典型腸道病毒樣細胞病變，4例糞便標本在該細胞系上也均出現(xiàn)陽性反應；而24份接種于293細胞系的CSF標本則沒有檢測到CPE。對分離陽性毒株通過電鏡了解其外部形態(tài)。然后提取病毒RNA、利用腸道病毒5’端非編碼區(qū)的高保守性，以兩對腸道病毒通用引物引導的逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR，
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