生命早期益生菌干預對變應性鼻炎大鼠CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T淋巴細胞及其轉錄因子Foxp3+的影響.pdf

1、目的：探討生命早期益生菌干預對變應性鼻炎大鼠模型的CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T淋巴細胞及其轉錄因子 Foxp3+的影響。
　　方法：1.將新生 SD大鼠30只隨機分為變應性鼻炎組（A組）、益生菌干預組（B組）、陰性對照組（C組）：益生菌干預組予以益生菌制品雙歧桿菌三聯(lián)活菌溶液對 SD大鼠于出生后7日進行經(jīng)口灌胃至出生后6周,劑量為300mg/kg2d-1,變應性鼻炎組及陰性對照組以等量生理鹽水灌胃處理;采用卵清蛋白(ovalbumi

2、n,OVA)混懸液1ml對變應性鼻炎組及益生菌干預組進行腹腔注射，隔日1次，共7次，致敏后，以2％OVA50μl/側滴鼻,連續(xù)7日，激發(fā)建立變應性鼻炎大鼠模型，陰性對照組以生理鹽水代替腹腔注射及滴鼻。末次激發(fā)后30分鐘內(nèi)對 SD大鼠的搔鼻、鼻溢、噴嚏等行為進行觀察，采用疊加量化法進行癥狀評分，＞5分表示造模成功；2.末次激發(fā)后24小時內(nèi)采集適量大鼠鼻腔粘膜組織，進行 HE染色觀察鼻腔粘膜嗜酸性粒細胞、淋巴細胞浸潤程度及毛細血管擴張充血程

3、度；3.運用ELISA法檢測大鼠血清中IgE的水平；4.運用流式細胞儀檢測大鼠脾臟和胸腺組織，分析 CD4+CD25+Treg細胞占 CD4+T細胞的百分比;5.采用Real-time PCR檢測大鼠脾臟和胸腺組織中Foxp3+mRNA的表達情況。
　　結果：1.益生菌干預組發(fā)生過敏性鼻炎的大鼠數(shù)量顯著少于變應性鼻炎組，差異具有統(tǒng)計學意義（χ2=7.2000，P<0.05）；益生菌干預組癥狀評分（0.72±0.31）明顯低于變應性

4、鼻炎組癥狀評分（7.61±1.92），差異具有統(tǒng)計學意義（t=11.2029，P<0.05）；2.鼻腔粘膜病理學觀察中益生菌干預組固有層無明顯的血管擴張充血，未見嗜酸性粒細胞、淋巴細胞浸潤；變應性鼻炎組出現(xiàn)固有層血管擴張充血，可見多量嗜酸性粒細胞、淋巴細胞浸潤。3.益生菌干預組大鼠血清 IgE（29.91±4.88 ng/ml）顯著低于變應性鼻炎組（116.21±10.71 ng/ml），差異有統(tǒng)計學意義（t=23.1877，P<0.0

5、5）,與陰性對照組（16.81±4.72 ng/ml）差異無統(tǒng)計學意義（t=6.1018，P>0.05）；4.益生菌干預組大鼠脾臟和胸腺中CD4+CD25+Treg細胞占 CD4+T細胞的百分比（12.07±2.87%，30.81±6.22%）顯著高于變應性鼻炎組（5.46±1.19%，14.82±3.92%），差異有統(tǒng)計學意義（t=-6.7278，-6.8775，P<0.05）,與陰性對照組（11.05±2.91%，27.95±5.9

6、4%）差異無統(tǒng)計學意義（t=0.7892，1.0516，P>0.05）；5.益生菌干預組脾臟和胸腺中Foxp3+mRNA的表達（20.07±4.89，18.81±3.64）顯著高于變應性鼻炎組（5.66±2.21，9.81±2.76），差異有統(tǒng)計學意義（t=-8.49178，-6.2303，P<0.05），與陰性對照組（19.75±4.27，17.95±3.51）差異無統(tǒng)計學意義（t=0.1559，0.5378，P>0.05）。