生命早期益生菌干預(yù)對(duì)變應(yīng)性鼻炎大鼠CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞及其轉(zhuǎn)錄因子Foxp3+的影響.pdf

1、目的：探討生命早期益生菌干預(yù)對(duì)變應(yīng)性鼻炎大鼠模型的CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞及其轉(zhuǎn)錄因子 Foxp3+的影響。
　　方法：1.將新生 SD大鼠30只隨機(jī)分為變應(yīng)性鼻炎組（A組）、益生菌干預(yù)組（B組）、陰性對(duì)照組（C組）：益生菌干預(yù)組予以益生菌制品雙歧桿菌三聯(lián)活菌溶液對(duì) SD大鼠于出生后7日進(jìn)行經(jīng)口灌胃至出生后6周,劑量為300mg/kg2d-1,變應(yīng)性鼻炎組及陰性對(duì)照組以等量生理鹽水灌胃處理;采用卵清蛋白(ovalbumi

2、n,OVA)混懸液1ml對(duì)變應(yīng)性鼻炎組及益生菌干預(yù)組進(jìn)行腹腔注射，隔日1次，共7次，致敏后，以2％OVA50μl/側(cè)滴鼻,連續(xù)7日，激發(fā)建立變應(yīng)性鼻炎大鼠模型，陰性對(duì)照組以生理鹽水代替腹腔注射及滴鼻。末次激發(fā)后30分鐘內(nèi)對(duì) SD大鼠的搔鼻、鼻溢、噴嚏等行為進(jìn)行觀察，采用疊加量化法進(jìn)行癥狀評(píng)分，＞5分表示造模成功；2.末次激發(fā)后24小時(shí)內(nèi)采集適量大鼠鼻腔粘膜組織，進(jìn)行 HE染色觀察鼻腔粘膜嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)程度及毛細(xì)血管擴(kuò)張充血程

3、度；3.運(yùn)用ELISA法檢測(cè)大鼠血清中IgE的水平；4.運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)大鼠脾臟和胸腺組織，分析 CD4+CD25+Treg細(xì)胞占 CD4+T細(xì)胞的百分比;5.采用Real-time PCR檢測(cè)大鼠脾臟和胸腺組織中Foxp3+mRNA的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：1.益生菌干預(yù)組發(fā)生過敏性鼻炎的大鼠數(shù)量顯著少于變應(yīng)性鼻炎組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=7.2000，P<0.05）；益生菌干預(yù)組癥狀評(píng)分（0.72±0.31）明顯低于變應(yīng)性

4、鼻炎組癥狀評(píng)分（7.61±1.92），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=11.2029，P<0.05）；2.鼻腔粘膜病理學(xué)觀察中益生菌干預(yù)組固有層無明顯的血管擴(kuò)張充血，未見嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)；變應(yīng)性鼻炎組出現(xiàn)固有層血管擴(kuò)張充血，可見多量嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。3.益生菌干預(yù)組大鼠血清 IgE（29.91±4.88 ng/ml）顯著低于變應(yīng)性鼻炎組（116.21±10.71 ng/ml），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=23.1877，P<0.0

5、5）,與陰性對(duì)照組（16.81±4.72 ng/ml）差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=6.1018，P>0.05）；4.益生菌干預(yù)組大鼠脾臟和胸腺中CD4+CD25+Treg細(xì)胞占 CD4+T細(xì)胞的百分比（12.07±2.87%，30.81±6.22%）顯著高于變應(yīng)性鼻炎組（5.46±1.19%，14.82±3.92%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-6.7278，-6.8775，P<0.05）,與陰性對(duì)照組（11.05±2.91%，27.95±5.9

6、4%）差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.7892，1.0516，P>0.05）；5.益生菌干預(yù)組脾臟和胸腺中Foxp3+mRNA的表達(dá)（20.07±4.89，18.81±3.64）顯著高于變應(yīng)性鼻炎組（5.66±2.21，9.81±2.76），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-8.49178，-6.2303，P<0.05），與陰性對(duì)照組（19.75±4.27，17.95±3.51）差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.1559，0.5378，P>0.05）。