休克腸淋巴對大鼠紅細胞代謝的作用.pdf

1、背景：休克發(fā)病學過程中的血液流變學事件，是決策休克臨床救治、影響休克轉歸的關鍵因素。紅細胞流變行為是影響血液流變性和微循環(huán)的主要因素之一。能量代謝與紅細胞流變行為密切相關。近年來的研究表明，腸淋巴途徑在休克后微循環(huán)障礙乃至多器官損傷的發(fā)病學中具有重要作用。因此，闡明腸淋巴途徑對休克后紅細胞能量代謝的影響成為探討休克腸淋巴液與血液流變性關系的關鍵因素。
　　 目的：本研究以腸淋巴液為切入點，應用腸淋巴液引流技術，觀察休克腸淋巴液引

2、流對失血性休克及液體復蘇后大鼠紅細胞三磷酸腺苷(adenosine5’-triphosphate， ATP)、乳酸(lactic acid, LA)、2,3-DPG以及紅細胞內外離子濃度的影響；同時制備紅細胞膜懸液，觀察休克腸淋巴液引流對紅細胞膜泵活性的影響；進一步將引流的休克腸淋巴液輸入正常大鼠，觀察上述指標的變化，進而探討休克腸淋巴液對紅細胞能量代謝的影響，深入揭示腸淋巴途徑在休克發(fā)病學中的意義，為重癥休克的防治提供實驗依據(jù)與理論參

3、考。
　　 方法：①18只Wistar雄性大鼠隨機均分為假休克組、休克組、休克腸淋巴液引流組（引流組），所有大鼠經(jīng)戊巴比妥鈉肌肉注射麻醉后，行股部手術，右股靜脈注射肝素鈉全身抗凝，右股動脈插管連接生物信號采集系統(tǒng)，連續(xù)監(jiān)測平均動脈血壓(mean artery pressure， MAP)；左股側動脈插管后連接注射器固定于抽注機上備放血用；腹部手術，剝離腸系膜淋巴管。待所有手術完成、穩(wěn)定30min后，休克組與引流組大鼠經(jīng)左股動脈勻

4、速放血，10min內將MAP降至40mmHg，復制失血性休克模型。假休克組大鼠進行相同的手術操作，不放血。引流組大鼠維持低血壓1h后，行腸系膜淋巴管插管，引流休克腸淋巴液至休克3h。②另取18只Wistar雄性大鼠隨機均分為假休克組、休克后復蘇組、休克引流并復蘇組，按前述方法復制失血性休克模型后，休克后復蘇組與休克引流并復蘇組維持低血壓1.5h后，行液體復蘇（全血量+等量林格氏液）30min，復蘇結束后繼續(xù)觀察至3h，其中休克引流并復蘇

5、組在低血壓1h后引流休克各期淋巴液。③將引流的休克1～3h腸淋巴液去細胞，淋漿以等量生理鹽水稀釋后回榆至已完成手術的正常大鼠(2ml/kg，n=6)，時間為30min，作為休克腸淋巴液輸入組（輸液組）。④休克組維持低血壓3h(或液體復蘇后3h)、引流組引流休克1～3h腸淋巴液(或液體復蘇后3h)后、輸液組在輸入休克腸淋巴液結束后2.5h、假休克組在相應時間點，經(jīng)腹主動脈取血，制備血漿，檢測Na+、K+、Cl-、Ca濃度；部分全紅細胞標本

6、制備紅細胞內液，用于檢測Na+、K+濃度、2，3-DPG含量；部分全紅細胞標本制備紅細胞膜懸液，應用定磷法檢測紅細胞膜泵活性(包括Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase)、ATP（磷鉬酸比色法）、LA（遞氫法）濃度。
　　 結果：①休克腸淋巴液引流對大鼠紅細胞能量代謝與膜泵功能的影響：休克組以及引流組大鼠紅細胞2，3-DPG、LA含量顯著高于、ATP含量顯著低于假休克組，且引流組2，3-DPG、ATP含量高于休克組；

7、休克大鼠紅細胞膜Na+-K+-ATPase與Ca2+-ATPase活性顯著低于假休克組，引流組Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性均顯著高于休克組，且與假休克組無統(tǒng)計學差異；休克組血漿僅K+濃度高于假休克組、引流組紅細胞內液Na+濃度顯著低于休克組。②腸淋巴液引流對休克復蘇大鼠紅細胞能量代謝與膜泵功能的影響：輸液復蘇后，休克后復蘇組與休克引流并復蘇組大鼠紅細胞ATP含量均顯著低于假休克組，休克引流并復蘇組2，3-DPG

8、含量、休克后復蘇組LA含量顯著高于假休克組，休克引流并復蘇組2，3-DPG、ATP含量顯著高于、LA含量顯著低于休克后復蘇組；休克后復蘇組大鼠紅細胞Na+-K+-ATPase與Ca2+-ATPase活性顯著低于、休克引流并復蘇組Na+-K+-ATPase活性顯著高于假休克組，休克引流并復蘇組Na+-K+-ATPase與Ca2+-ATPase活性均顯著高于休克后復蘇組；休克后復蘇組大鼠血漿的K+與cl-顯著高于、Ca低于假手術組。③靜脈輸

9、入休克腸淋巴液對正常大鼠紅細胞能量代謝與膜泵功能的影響：回輸休克1～3h腸淋巴液的輸液組大鼠紅細胞2，3-DPG與LA含量顯著高于、ATP含量、紅細胞膜Na+-K+-ATPase與Ca2+-ATPase活性顯著低于對照組。
　　 結論：研究結果表明，持續(xù)低血壓大鼠紅細胞能量代謝障礙的表現(xiàn)為2,3-DPG代償性增加、ATP減少、LA堆積、紅細胞膜泵活性降低，并引起血鉀升高。休克腸淋巴液引流增強了2，3-DPG的代償、提高了ATP生

10、成、減少LA堆積、提高了膜泵活性；休克復蘇大鼠出現(xiàn)了ATP減少、LA堆積、膜泵活性降低的能量代謝障礙的表現(xiàn)，休克引流并復蘇組雖ATP含量減少，但卻明顯促進了2，3-DPG的代償、提高了ATP含量、降低了LA水平、提高了膜泵活性、維持了K+與Cl-平衡，對于休克復蘇后的紅細胞能量代謝障礙發(fā)揮了較好的干預作用；靜脈輸入休克腸淋巴液則降低了正常大鼠的ATP含量與膜泵活性，引起了LA增多；因此，腸淋巴液在休克紅細胞能量代謝障礙的發(fā)病學中發(fā)揮重要