腸淋巴管結(jié)扎對(duì)失血性休克大鼠多器官ATP含量及膜泵功能的影響.pdf

1、能量代謝障礙、細(xì)胞膜泵功能障礙是引起細(xì)胞損傷的重要機(jī)制，腸淋巴途徑在重癥休克多器官損傷的發(fā)病學(xué)中具有重要作用，腸淋巴管結(jié)扎減少休克腸淋巴液回流可減輕失血性休克大鼠肺、腎、心肌、肝的組織學(xué)損傷與功能障礙，其作用機(jī)制與降低自由基損傷與炎癥反應(yīng)有關(guān)。但腸淋巴途徑在休克多器官組織細(xì)胞能量代謝與膜泵功能的作用，值得研究。
　　 目的：為了進(jìn)一步探討腸淋巴途徑在休克發(fā)病學(xué)中的作用，了解阻斷休克腸淋巴液回流對(duì)失血性休克大鼠囂官能量代謝與細(xì)胞膜

2、泵的作用，本研究觀察腸淋巴管結(jié)扎對(duì)失血性休克大鼠不同時(shí)間肺、腎、心肌、肝等組織能量代謝指標(biāo)三磷酸腺苷(ATP)含量、細(xì)胞膜泵(ATPase)活性的影響，為揭示休克時(shí)多器官損傷的發(fā)病機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：Wistar雄性大鼠78只，隨機(jī)分為分為：假手術(shù)組(n=6)；休克組（休克90min、液體復(fù)蘇后0h、1h、3h、6h、12h、24h等時(shí)間點(diǎn)，均n=6）、結(jié)扎組（液體復(fù)蘇后1h、3h、6h、12h、24h等時(shí)間點(diǎn)，均n

3、=6）。所有大鼠經(jīng)戊巴比妥鈉肌肉注射麻醉后，頸部無菌手術(shù)，行右側(cè)頸總動(dòng)脈和左側(cè)頸靜脈插管，備放血及輸液，舌靜脈注射肝素全身抗凝。穩(wěn)定10min后，休克組與結(jié)扎組大鼠經(jīng)自動(dòng)抽注機(jī)自頸總動(dòng)脈勻速放血（失血量為全血量的1/5，全血量以體重1/13計(jì)），3min完成，保留備回輸。以無菌林格式液瓶作為Lamson瓶，連接無菌輸液器，將液面調(diào)整至固定高度，維持低血壓（40mmHg）90min，復(fù)制大鼠重癥失血性休克模型。然后，休克組、結(jié)扎組自左側(cè)頸

4、靜脈緩慢回輸血液及林格氏液（量為全血量），時(shí)間≥20min。液體復(fù)蘇后行腹部手術(shù)，結(jié)扎組行腸系膜淋巴管結(jié)扎術(shù)；休克組及假手術(shù)組在腸系膜淋巴管下穿線，不結(jié)扎。假手術(shù)組僅麻醉及頸部、腹部手術(shù)，不放血及輸液。休克組于維持低血壓90min后、液體復(fù)蘇后0h、1h、3h、6h、12h、24h，休克組及結(jié)扎組于液體復(fù)蘇后1h、3h、6h、12h、24h，假手術(shù)組于完成假手術(shù)后，分別處死動(dòng)物，留取固定位置的肺、腎、心肌、肝組織，制備組織勻漿，應(yīng)用高壓

5、液相色譜檢測各器官組織勻漿ATP含量，以定磷法檢測各器官組織勻漿Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性。
　　 結(jié)果：①腸淋巴管結(jié)扎對(duì)失血性休克大鼠各器官組織ATP含量的影響：失血性休克后，在輸液復(fù)蘇后24h內(nèi)，休克組大鼠肺、心肌組織ATP含量出現(xiàn)了先增高、后降低、再升高的趨勢，結(jié)扎組大組則肺、心肌組織ATP含量在早期(3h前)低于休克組，后期（6h后）高

6、于休克組；休克組大鼠腎、肝組織ATP含量則出現(xiàn)了持續(xù)下降的趨勢，至液體復(fù)蘇后24h才升高，但仍低于假手術(shù)組，結(jié)扎組腎、肝組織ATP含量雖在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)上低于假手術(shù)組，但均高于休克組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)。②腸淋巴管結(jié)扎對(duì)失血性休克大鼠各器官組織細(xì)胞膜ATPase活性的影響：在休克90min時(shí)，除心肌組織Na+-K+-ATPase顯著低于sham組外，失血性休克大鼠的肺、腎、心肌、肝組織Na+-K+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-AT

7、Pase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性與sham組無顯著差異；液體復(fù)蘇后，失血性休克大鼠各組織細(xì)胞ATPase活性均出現(xiàn)了下降的趨勢，維持低水平至12h，隨后出現(xiàn)增高趨勢，肺、腎、心肌、肝組織Na+-K+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性在復(fù)蘇后即刻至12h的多個(gè)時(shí)間點(diǎn)均顯著低于sham組、輸液復(fù)蘇即刻及1h;至液體復(fù)蘇24h，肺、腎、心肌、肝組織細(xì)胞的Na+-K

8、+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性均恢復(fù)至sham組水平，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且多個(gè)ATPase活性高于休克復(fù)蘇后1h。結(jié)扎腸淋巴管的結(jié)扎組大鼠在液體復(fù)蘇后，除肝組織細(xì)胞Mg2+-ATPase活性在復(fù)蘇后3h與6h、Ca2+-Mg2+-ATPase活性在復(fù)蘇后6h顯著低于sham組外，其它各組織細(xì)胞在復(fù)蘇后各時(shí)間點(diǎn)的ATPase活性均與sham組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；各組織細(xì)胞在復(fù)蘇

9、后1～12h之間的多個(gè)時(shí)間點(diǎn)的ATPase活性均顯著高于休克組相同時(shí)間點(diǎn)；在液體復(fù)蘇后24h，休克組與結(jié)扎組大鼠各器官組織細(xì)胞的Na+-K+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase均無顯著差異。
　　 結(jié)論：在休克發(fā)展進(jìn)程中，肺、心肌組織早期ATP含量出現(xiàn)代償性增加，后逐漸下降；腎、肝組織ATP含量逐漸下降；至休克液體復(fù)蘇后24h，各器官ATP含量回升；腸淋巴管結(jié)扎阻斷休克