膽汁外引流對失血性休克時多器官功能的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討膽汁外引流對失血性休克時腸屏障功能的影響；膽汁外引流對肝臟中血紅素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）表達(dá)的影響；膽汁外引流對失血性休克時多器官功能的保護(hù)作用與HO-1的關(guān)系。
　　方法：運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附實驗、實時反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)、蛋白免疫印跡、免疫組織化學(xué)染色、組織病理評分等多種技術(shù)方法從功能學(xué)、形態(tài)學(xué)、分子生物學(xué)的角度綜合研究多器官功能的變化及其機(jī)制。首先，通過股靜脈置管放血法建立失血性休克大

2、鼠模型，通過留置膽總管導(dǎo)管進(jìn)行膽汁外引流，研究失血性休克膽汁外引流后腸屏障功能的改變。其次，通過留置膽總管導(dǎo)管進(jìn)行膽汁外引流，研究膽汁外引流后肝臟中 HO-1表達(dá)的變化。最后，在造模前24小時部分大鼠給予HO-1特異性抑制劑鋅原卟啉，檢測失血性休克膽汁外引流后多器官功能改善與 HO-1的關(guān)系。
　　結(jié)果：失血性休克時，膽汁外引流后6小時血漿中 D乳酸及脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）水平顯著下降（P<0.05

3、）；膽汁外引流后4小時、6小時回腸中緊密連接蛋白o(hù)ccludin的表達(dá)顯著升高（P<0.05）；膽汁外引流后6小時回腸中緊密連接蛋白claudin-1的表達(dá)顯著升高（P<0.05）；膽汁外引流后2小時、4小時、6小時回腸上皮細(xì)胞壞死脫落現(xiàn)象明顯減輕，回腸組織病理評分明顯下降（P<0.05）。膽汁外引流后1小時、6小時肝臟中HO-1的表達(dá)明顯升高（P<0.05）。失血性休克時，膽汁外引流后大鼠空腸中腫瘤壞死因子-α（tumor necro

4、sis factorα，TNF-α）mRNA水平顯著下降（P<0.05）；膽汁外引流后大鼠空腸、回腸中緊密連接蛋白o(hù)ccludin及水通道蛋白-1（aquaporin-1，AQP-1）水平顯著升高（P<0.05）；膽汁外引流后大鼠肺臟和腎臟的干/濕比顯著增加（P<0.05）；膽汁外引流后大鼠肺臟和腎臟中髓過氧化物酶水平顯著下降（P<0.05）；膽汁外引流后大鼠肺臟和腎臟中TNF-αmRNA水平顯著下降（P<0.05）；膽汁外引流后大鼠肺