乳腺癌干細(xì)胞促淋巴管生成及淋巴轉(zhuǎn)移的研究.pdf

1、背景和目的: 乳腺癌發(fā)病率逐年上升，已經(jīng)成為女性最常見的惡性腫瘤。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（lymph node metastasis，LNM）是乳腺癌轉(zhuǎn)移的最主要形式，也是導(dǎo)致患者預(yù)后不良的重要因素，腫瘤周圍及腫瘤內(nèi)部淋巴管生成是發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移的重要原因。腫瘤干細(xì)胞是近年來(lái)腫瘤領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)，乙醛脫氫酶1A1（aldehyde dehydrogenase1A1，ALDH1A1）以NAD或NADP為輔酶將醛類氧化成相應(yīng)的羧酸，在干細(xì)胞的自我保護(hù)中起重要

2、功能，同時(shí)與細(xì)胞分化密切相關(guān)，可以作為正常干細(xì)胞和腫瘤干細(xì)胞的一種特異性標(biāo)志物。本課題將研究乳腺癌組織中腫瘤干細(xì)胞表達(dá)與淋巴轉(zhuǎn)移的關(guān)系，并探討乳腺癌干細(xì)胞通過淋巴管生成促進(jìn)乳腺癌淋巴轉(zhuǎn)移發(fā)生的可能機(jī)制。
　　材料與方法: 應(yīng)用免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)乳腺癌組織病理切片中ALDH1A1+乳腺癌干細(xì)胞的表達(dá)率，分析其表達(dá)與患者淋巴轉(zhuǎn)移及預(yù)后的關(guān)系；應(yīng)用微球體培養(yǎng)法從乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231中富集乳腺癌干細(xì)胞[1]，使用血管內(nèi)皮生

3、長(zhǎng)因子C（VEGF-C）對(duì)其進(jìn)行誘導(dǎo)[2]，并應(yīng)用DAPT抑制Notch通路阻斷乳腺癌干細(xì)胞的生物活性作為對(duì)照[3]，應(yīng)用 PCR檢測(cè)兩組細(xì)胞在不同處理后淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)志物VEGFR-3/PROX/LYVE mRNA的表達(dá)情況，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)兩組細(xì)胞在不同處理后淋巴管內(nèi)皮特異性標(biāo)志物 VEGFR-3的表達(dá)情況。
　　結(jié)果: 72例乳腺癌患者中，ALDH1A1陽(yáng)性表達(dá)29例，占40.28％，ALDH1A1陰性表達(dá)43例，

4、占59.72%；ALDH1A1陽(yáng)性表達(dá)率在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（56.76%），顯著高于非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（22.86%），P＜0.01；根據(jù)ROC曲線所得截?cái)嘀担?.5）將患者分為 ALDH1A1高表達(dá)組及低表達(dá)組，Kaplan-Meier生存分析表明ALDH1A1高表達(dá)組患者總生存期、無(wú)病生存期、五年生存率及五年無(wú)病生存率顯著低于ALDH1A1低表達(dá)組，二組間具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.01。單因素及多因素統(tǒng)計(jì)分析表明，ALDH1A1表達(dá)、淋巴

5、轉(zhuǎn)移及腫瘤 TNM分期是與乳腺癌預(yù)后相關(guān)的重要獨(dú)立因素，ALDH1A1高表達(dá)組患者預(yù)后顯著差于 ALDH1A1低表達(dá)組，P＜0.05。
　　微球體培養(yǎng)法從乳腺癌細(xì)胞系 MDA-MB-231中富集的乳腺癌干細(xì)胞在VEGF-C誘導(dǎo)后，淋巴管內(nèi)皮特異性標(biāo)志物VEGFR-3、LYVE及PROX的mRNA表達(dá)顯著高于對(duì)照組，P＜0.05；而以DAPT抑制腫瘤干細(xì)胞信號(hào)通路后則淋巴管內(nèi)皮特異性標(biāo)志物表達(dá)量極低，并與對(duì)照組差異不明顯，P>0.0