碘對比劑致人腎小管上皮細胞毒性及阿托伐他汀保護作用.pdf

1、目的：
　　1.以體外培養(yǎng)的人近端腎小管上皮細胞（HK-2）為模型，比較等滲和低滲碘對比劑的細胞毒性作用。
　　2.探討NADPH氧化酶在碘對比劑致HK-2細胞毒性中的作用。
　　3.探討阿托伐他汀對碘對比劑致HK-2細胞毒性的保護作用及可能機制。
　　方法：
　　1.分別予200mg I/ml、100 mg I/ml、50mg I/ml碘克沙醇(IOCM)和碘海醇(LOCM)干預(yù)HK-2細胞1h、3h、6

2、h、12h。采用MTT法檢測細胞活力;收集細胞培養(yǎng)上清液測定LDH水平檢測細胞損傷。
　　2.應(yīng)用碘海醇(200mg I/ml)干預(yù)HK-2細胞6h建立細胞損傷模型，研究NADPH氧化酶抑制劑-Apocynin對其保護作用。采用MTT法檢測細胞活力;采用RT-PCR方法檢測細胞內(nèi)NOX4和p22phoxmRNA表達。
　　3.分別予1μmol/l、20μmol/l、40μmol/l阿托伐他汀預(yù)處理HK-2細胞2h，同上建立細

3、胞損傷模型，采用MTT法檢測細胞活力;細胞損傷模型組予40μmol/l阿托伐他汀預(yù)處理2h，采用RT-PCR方法檢測細胞內(nèi)NOX4、p22phoxmRNA表達水平;流式細胞儀測定凋亡細胞比例;透射電鏡觀察細胞形態(tài)學變化。
　　結(jié)果：
　　1.與對照組相比，等滲、低滲碘對比劑干預(yù)組HK-2細胞活力均明顯降低，LDH水平明顯增高(P＜0.05，P＜0.05);隨著碘濃度的增加、作用時間的延長，碘對比劑對HK-2細胞的毒性增加(P

4、＜0.05，P＜0.05);相同碘濃度和作用時間下，等滲對比劑對HK-2細胞的毒性低于低滲對比劑(P＜0.05)。
　　2.與對照組相比，碘海醇(200mg I/ml)干預(yù)HK-2細胞6h后，細胞活力明顯降低(P＜0.05)，NOX4、p22phoxmRNA表達水平明顯增高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05); Apocynin組細胞活力高于模型組(P＜0.05)，NOX4、p22phoxmRNA表達水平較模型組下調(diào)，差異有統(tǒng)計學意

5、義(P＜0.05)。
　　3.HK-2細胞損傷模型經(jīng)不同濃度阿托伐他汀預(yù)處理后，細胞活力增強(P＜0.05)，并呈劑量依賴性。予40μmol/l阿托伐他汀預(yù)處理2h后，細胞損傷模型組細胞內(nèi)NOX4、p22phoxmRNA表達水平明顯降低(P＜0.05);凋亡細胞比例顯著減少(P＜0.05);透射電鏡下細胞損傷程度減輕。
　　結(jié)論：
　　1.在本實驗研究范圍內(nèi)，等滲和低滲碘對比劑對HK-2細胞均有明顯的毒性作用，且呈劑量