亞低溫對顱腦創(chuàng)傷大鼠腦組織中BACE-1及Aβ表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討亞低溫對液壓沖擊腦損傷(Traumatic brain injury，TBI)大鼠海馬區(qū)β-分泌酶(β-site APP-cheaving enzyme，BACE-1)及其作用于β-淀粉樣蛋白前體蛋白（β-amyloid protein precursor，APP）的產(chǎn)物β-淀粉樣蛋白(β-amyloidprotein，Aβ)的影響。
　　 方法：成年健康雄性Wistar大鼠30只按隨機(jī)數(shù)字表法分為對照組、TBI常溫組

2、（37.0±0.5℃）和TBI亞低溫組（32.0±0.5℃），每組10只。選用液壓沖擊致傷法建立中度顱腦創(chuàng)傷動物模型，給予常溫或亞低溫干預(yù)6h后，觀察大鼠行為學(xué)變化。完成行為學(xué)觀察后處死實(shí)驗(yàn)動物，留取部分大鼠海馬組織迅速置于液氮中后轉(zhuǎn)至-70℃冰箱保存，留取部分大鼠全腦組織生理鹽水沖洗后置于4％的多聚甲醛溶液中固定。隨機(jī)選取多聚甲醛溶液中的大鼠全腦組織制成石蠟切片，HE染色觀察大鼠腦組織病理學(xué)改變。逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢

3、測海馬區(qū)APP、Aβ、BACE-1mRNA表達(dá)，組織免疫熒光和蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測APP、Aβ、BACE-1蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：與對照組比較，TBI常溫組神經(jīng)功能行為評分顯著降低（26.08±1.23比35.00±0.00，P＜0.05），腦海馬區(qū)存活的神經(jīng)元數(shù)量減少，APP、Aβ、BACE-1陽性神經(jīng)元數(shù)量明顯增加，APP、Aβ、BACE-1mRNA及其相關(guān)蛋白表達(dá)明顯升高(APP mRNA:1.49±0.12比0.71±

4、0.08， BACE-1 mRNA:1.54±0.06比0.3±0.03，APP蛋白:1.78±0.03比0.763±0.023，Aβ蛋白:1.32±0.24比0.09±0.002，BACE-1蛋白:1.52±0.04比0.12±0.031均P＜0.05）。與TBI常溫組比較，TBI亞低溫干預(yù)能顯著提高大鼠TBI后神經(jīng)功能行為評分（32.29±1.31比26.08±1.23），增加腦海馬區(qū)存活的神經(jīng)元數(shù)量，減少APP、Aβ、BACE-1

5、陽性神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)，APP、Aβ、BACE-1mRNA及其相關(guān)蛋白表達(dá)顯著降低(APP mRNA:0.73±0.08比1.49±0.12， BACE-1 mRNA:0.51±0.043比1.54±0.06，APP蛋白:0.653±0.02比1.78±0.03，Aβ蛋白:0.12±0.003比1.32±0.24，BACE-1蛋白:0.36±0.03比1.52±0.02均P＜0.05）。
　　 結(jié)論：TBI大鼠腦組織中APP和Aβ蓄積