2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:本研究以宮頸癌Caski細胞為研究對象,分析ANXA2在EGF誘導(dǎo)的EMT過程中發(fā)揮的作用及其機制,以及miR-155對ANXA2上述功能的影響,以進一步評估ANXA2和miR-155作為宮頸癌早期侵襲轉(zhuǎn)移指標的潛在價值。
  方法:(1)EGF處理人宮頸癌細胞 Caski,檢測其對細胞形態(tài)、增殖和侵襲轉(zhuǎn)移的影響,及ANXA2表達量的改變;(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒pcDNA3.1(+)/ANXA2、pcDNA3.1(-)/miR-

2、155,并且篩選穩(wěn)定高表達ANXA2細胞株;(3)MTT法觀察克隆細胞生長狀況,流式細胞術(shù)檢測細胞周期的改變;(4)細胞劃痕、Transwell試驗檢測ANXA2高表達對Caski細胞遷移能力的影響,Western blot檢測E-Cad的表達;(5)構(gòu)建質(zhì)粒pcDNA3.1(-)/miR155并瞬轉(zhuǎn)Caski細胞,然后用上述方法測定miR-155高表達對細胞增殖、細胞周期,細胞遷移和E-Cad表達的影響。
  結(jié)果:(1)與未做

3、任何處理的Caski細胞相比,EGF處理后Caski細胞表現(xiàn)出典型的間質(zhì)細胞樣形態(tài):細胞梭形或細長形,細胞與細胞之間連接松散。Western blot結(jié)果提示EGF下調(diào)E-Cad的表達,上調(diào)N-Cad的表達。FCM結(jié)果顯示EGF能促進細胞生長,EGF處理48h后更多的細胞出現(xiàn)在S期(Caski細胞21.5%,Caski/EGF29.7%)和G2/M期(Caski細胞7.6%,Caski/EGF13.3%),而G0/G1其細胞明顯減少(C

4、aski細胞70.9%,Caski/EGF56.9%)。(2)EGF誘導(dǎo)的EMT過程伴隨ANXA2表達量明顯增加,且呈劑量和時間依賴性。(3)穩(wěn)定克隆細胞Caski/ANXA2比Caski、Caski/pcDNA3.1(+)細胞表現(xiàn)出更高的增殖潛能(P<0.05),而Caski與Caski/pcDNA3.1(+)細胞增殖率之間無明顯差異。高表達ANXA2使處于S期和G2-M期的Caski細胞明顯升高,而處于G0/G1期的細胞明顯下降(P

5、<0.05),提示上調(diào)ANXA2促進Caski細胞生長。(4)高表達ANXA2顯著性下調(diào)E-Cad表達水平,而miR-155高表達能逆轉(zhuǎn)ANXA2對E-Cad表達的抑制性影響。這些結(jié)果表明,ANXA2促進EMT進程,而miR-155作用相反。(5)Caski/ANXA2細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力明顯高于Caski和Caski/pcDNA3.1(+)細胞。而Caski細胞和Caski/pcDNA3.1(+)細胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力之間無明顯差別。高表

6、達miR-155能逆轉(zhuǎn)ANXA2對Caski細胞轉(zhuǎn)移能力的影響。這些結(jié)果顯示miR-155抑制ANXA2誘導(dǎo)的Caski細胞轉(zhuǎn)移。
  結(jié)論:(1)體外EGF能誘導(dǎo)Caski細胞發(fā)生EMT,并表現(xiàn)出更高的增殖潛能。(2) EGF誘導(dǎo)EMT過程伴隨著ANXA2的高表達。(3)穩(wěn)定高表達ANXA2明顯促進細胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移。(4) ANXA2誘發(fā)細胞的惡性特征可被mir-155部分逆轉(zhuǎn)。上述結(jié)果提示,ANXA2和miR-155有作為

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