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文檔簡介
1、目的:用攜帶增強型綠色熒光蛋白(EGFP)報告基因的人血管內(nèi)皮細胞生長因子121(hVGF121)的真核質(zhì)粒轉染骨髓間充質(zhì)干細胞(BMCs),觀察其表達,并檢測融合蛋白對細胞增殖和血管通透性的影響。 方法:擴增已構建的pEGFP-N2-hVEGF121重組質(zhì)粒,脂質(zhì)體法轉染BMCs;熒光顯微鏡下觀測綠色熒光蛋白的表達;Western Blot檢測VEGF蛋白的表達;MTT實驗和miles試驗分別檢測融合蛋白對細胞增殖和血管通透性
2、的影響。 結果:pEGFP-N2-hVEGF121成功轉染入骨髓間充質(zhì)干細胞,在熒光顯微鏡下可見強綠色熒光蛋白的表達,Westen Blot檢測到VEGF蛋白的表達。MTT試驗證實融合蛋白刺激人臍靜脈內(nèi)皮細胞增殖,與對照組相比有顯著性差異(P<0.05)。Miles試驗證實融合蛋白能夠增加血管壁的通透性。 結論:重組質(zhì)粒pEGFP-N2-hVEGF121體外轉染入骨髓間充質(zhì)干細胞后,目的基因能夠在細胞有效表達,檢測方法簡
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