hVEGF-,165-與嵌合水蛭肽融合基因構(gòu)建、表達(dá)和活性的研究.pdf

1、 為了研究具有內(nèi)皮修復(fù)功能的hVEGF165基因和抗栓功能的嵌合水蛭肽基因的融合基因在防治血管損傷后再狹窄中的作用，本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建了hVEGF165和嵌合水蛭肽基因的融合基因，經(jīng)體外觀察其抗栓及促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖活性，并觀察該融合基因局部轉(zhuǎn)移損傷的血管壁對(duì)兔頸總動(dòng)脈血管成形術(shù)后再狹窄的防治作用，為介入治療后再狹窄的防治提供新的思路和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。本文第一部分通過(guò)人工設(shè)計(jì)、合成、純化嵌合水蛭肽(26氨基酸肽)，并對(duì)其進(jìn)行體外活性檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)人

2、工嵌合多個(gè)有活性的抗栓片段是可行的。第二部分克隆了人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和嵌合水蛭肽融合基因，構(gòu)建了hVEGF165-FH/pcDNA3.0基因表達(dá)載體，并經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明hVEGF165和嵌合水蛭肽基因(FH)可成功融合。第三部分通過(guò)觀察融合基因hVEGF165-FH/pcDNA3.0在人內(nèi)皮細(xì)胞株中表達(dá)及其表達(dá)產(chǎn)物的體外活性，發(fā)現(xiàn)融合基因hVEGF165-FH可以在脂質(zhì)體介導(dǎo)下轉(zhuǎn)染內(nèi)皮細(xì)胞株并進(jìn)一步表達(dá)，其表達(dá)產(chǎn)物可以分泌至胞外并具有促進(jìn)內(nèi)皮