表皮參與瘢痕形成的實(shí)驗(yàn)和臨床研究.pdf

1、本文對表皮參與瘢痕形成進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)和臨床研究。文章分為三個部分： 在第一部分研究中，取少量燒傷后增生性瘢痕和臨近的正常皮膚組織，用免疫組化的方法比較兩種組織中角質(zhì)素14(與細(xì)胞增殖有關(guān))、角質(zhì)素10(與細(xì)胞分化有關(guān))和角質(zhì)素16(與細(xì)胞活化有關(guān))的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)瘢痕中角質(zhì)素16明顯表達(dá)增強(qiáng)，角質(zhì)素14稍弱，但角質(zhì)素10表達(dá)降低。同時，取兩種組織的表皮層，分離、純化總DNA，將等量的兩種組織的mRNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，合成熒光分子(Cy5

2、或Cy3)摻入的cDNA作為探針，與用約14000個人類基因PCR產(chǎn)物制成的微矩陣表達(dá)譜芯片進(jìn)行雜交，經(jīng)嚴(yán)格洗片后，掃描儀掃描芯片熒光信號圖象，計算機(jī)分析比較兩種組織中存在差異表達(dá)的基因。在14000個基因中，4例患者的瘢痕和正常表皮中共同存在差異的基因有138個，包括與瘢痕的形成密切相關(guān)的生長因子TGF-β，IL-1和ICAM-1等基因。結(jié)果提示瘢痕表皮的持續(xù)活化可能是瘢痕增生的重要原因。 在第二部分，我們切取增生期瘢痕和臨近

3、部位正常皮膚，進(jìn)行正常表皮細(xì)胞、正常成纖維細(xì)胞和瘢痕成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)，收集經(jīng)過12小時表皮細(xì)胞培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)液，分別配成0％、5％、10％和20％濃度的條件培養(yǎng)液，分別加入到每孔接種有104個正常和瘢痕成纖維細(xì)胞的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中。根據(jù)3H-TdR和3H-脯氨酸的摻入值計算成纖維細(xì)胞的增殖情況和膠原合成速率。經(jīng)統(tǒng)計，表皮細(xì)胞條件培養(yǎng)液能誘導(dǎo)正常皮膚成纖維細(xì)胞的增殖并降低膠原的合成。這表明用表皮或細(xì)胞膜片盡快覆蓋創(chuàng)面是抑制創(chuàng)面成纖維細(xì)

4、胞異常分泌膠原的手段。 在第三部分，選取11例需要進(jìn)行皮膚移植的住院整形患者，隨機(jī)將中厚供皮區(qū)創(chuàng)面分為兩個區(qū)域，一個區(qū)域進(jìn)行異體皮包裹的自體微粒皮移植，另一區(qū)域用凡士林紗布覆蓋，觀察創(chuàng)面愈合時間和日后瘢痕增生情況。雖然微粒皮組創(chuàng)面的愈合時間比對照組晚3.8天，但后期瘢痕增生較輕，表現(xiàn)在顏色、質(zhì)地和厚度均優(yōu)于凡士林紗布組。我們認(rèn)為此法能有效減輕瘢痕的形成，不僅適合中厚供皮區(qū)，也能適合深Ⅱ度燒傷的削痂創(chuàng)面。其關(guān)鍵是微粒皮的厚度和密度