姜黃素抑制磨損顆粒誘導(dǎo)EMMPRIN、MMP-2、MMP-9表達(dá)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察姜黃素對(duì)注有聚乙稀磨損顆粒小鼠air-pouch動(dòng)物模型囊壁組織炎性反應(yīng)及EMMPRIN、MMP-2、MMP-9表達(dá)的影響，并探討姜黃素干預(yù)磨損顆粒刺激EMMPRIN、MMP-2、MMP-9表達(dá)的作用機(jī)制。 方法：將高分子聚乙烯材料在體外加工成粒徑小于10μm的磨損顆粒。取健康昆明系小鼠72只，構(gòu)建air-pouch動(dòng)物模型成功后于囊腔中注入3 mL濃度為1×108個(gè)/mL聚乙稀顆粒懸液。動(dòng)物模型隨機(jī)分為3組（n=24

2、只），實(shí)驗(yàn)對(duì)照組（A組）：含6％聚乙二醇和含6％無(wú)水乙醇生理鹽水腹腔注射0.6 mL/d；低劑量（50mg/kg*d）實(shí)驗(yàn)組（B組）：濃度為1.6 mg/mL姜黃素溶液腹腔注射0.6 mL/d；高劑量（100mg/kg*d）實(shí)驗(yàn)組（C組）：濃度為3.2 mg/mL姜黃素溶液腹腔注射0.6mL/d。術(shù)后觀察動(dòng)物一般情況，于給藥后3、7及14 d每組分別處死動(dòng)物8只，取背部囊壁組織行大體、組織學(xué)觀察及免疫組織化學(xué)、RT-PCR、Wester

3、n blot檢測(cè)。 結(jié)果：各組小鼠均存活至實(shí)驗(yàn)完成。各組小鼠背部皮下均可見一白色的囊腔組織，各時(shí)間點(diǎn)A組囊腔直徑大于B、C組，14dC組囊壁直徑明顯小于B組。鏡下觀察7d、14dA組炎性反應(yīng)強(qiáng)于B、C組。7、14d給藥組炎性細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯低于對(duì)照組，C組明顯低于B組（P<0.05），3d各組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。給藥后7d B、C組與A組囊壁組織中MMP-2、MMP-9基因表達(dá)和陽(yáng)性細(xì)胞率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），EMMPR

4、IN表達(dá)無(wú)明顯差異（P>0.05）。給藥后14 d B、C組與A組囊壁組織中EMMPRIN、MMP-2、MMP-9基因表達(dá)和陽(yáng)性細(xì)胞率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而給藥后3 d各組間EMMPRIN、MMP-2、MMP-9表達(dá)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。給藥后7dC組MMP-9基因表達(dá)、陽(yáng)性細(xì)胞率與B組比較有明顯差異（P<0.05），而C組EMMPRIN、MMP-2基因表達(dá)、陽(yáng)性細(xì)胞率與B組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）

5、，給藥后14 dC組MMP-9基因表達(dá)、陽(yáng)性細(xì)胞率與B組比較差異顯著（P<0.01），C組EMMPRIN基因表達(dá)及陽(yáng)性細(xì)胞率與B組比較差異明顯（P<0.05），MMP-2基因及陽(yáng)性細(xì)胞率表達(dá)與B組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），給藥后組織核內(nèi)NF-κ BP65表達(dá)受到明顯抑制，7d、14 d給藥組NF-κ BP65表達(dá)量明顯低于實(shí)驗(yàn)對(duì)照組（P<0.05），且C組表達(dá)量明顯低于B組（p<0.05），3d時(shí)三組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>

6、0.05）。 結(jié)論：小鼠air-pouch動(dòng)物模型能較好的模擬假體周圍微環(huán)境，磨損顆?？梢源碳つ冶诮M織EMMPRIN、MMP-2、MMP-9的表達(dá)，且呈時(shí)間相關(guān)性。姜黃素可以抑制air-pouch動(dòng)物模型囊壁組織中炎性反應(yīng)及EMMPRIN、MMP-2、MMP-9的表達(dá)，對(duì)于EMMPRIN、MMP-9的表達(dá)高劑量組抑制效果強(qiáng)于低劑量，而高劑量，低劑量姜黃素對(duì)MMP-2表達(dá)抑制效果無(wú)明顯差異。姜黃素可能通過抑制NF-κ B的表達(dá)來(lái)調(diào)