肥胖與胃食管反流病的關(guān)系及肥胖大鼠食管下段菌群及乳桿菌種的變化的研究.pdf

1、第一章肥胖與胃食管反流病的關(guān)系及對患者生活心理質(zhì)量的影響
　　 目的:
　　 目前，國內(nèi)外均有相關(guān)研究表明，肥胖人群易患GERD癥狀，因此本研究的目的旨于分析肥胖患者各相關(guān)指標(biāo)與GERD癥狀發(fā)生的可能的關(guān)系。同時(shí)調(diào)查患者的生活質(zhì)量及心理健康狀態(tài)。從而了解肥胖與GERD的關(guān)系及肥胖合并GERD對患者的心身健康狀況的影響程度。
　　 方法:
　　 1病例選取標(biāo)準(zhǔn):選取2008年9月-2008年12月在中南大學(xué)

2、湘雅二醫(yī)院門診就診的符合RDQ量表診斷的胃食管反流病(GERD)患者83例，其中男性46名，女性37名，及無癥狀的陪同家屬84例，其中男性25名，女性59名為研究對象。
　　 2入選條件:患者入選條件為①依據(jù)RDQ量表評分≧12分的胃食管反流病(GERD)患者②年齡18歲以上③不具有排除標(biāo)準(zhǔn)條件④愿意接受調(diào)查并回訪者。
　　 3排除標(biāo)準(zhǔn):排除標(biāo)準(zhǔn)為①出現(xiàn)以下報(bào)警癥狀者:吞咽困難;吞咽痛;黑便;呼吸困難;體重減輕②胃癌、食

3、管癌等腫瘤患者及惡病質(zhì)者③消化性潰瘍患者④合并其他嚴(yán)重器質(zhì)性疾病及傳染?、菥裥睦砑膊、拮罱辉聝?nèi)服用過H2受體抑制劑、PPI類、減肥藥等藥物。⑦通過近期加強(qiáng)體育鍛煉或特殊手段減肥者。
　　 4肥胖標(biāo)準(zhǔn):以體質(zhì)指數(shù)(Body mass index，BMI)[BMI=體重/身高2(kg/m2)]作為肥胖判定的標(biāo)準(zhǔn)，我國將24≤BMI＜28為超重，BMI≥28為肥胖(obesity)。男性腰圍≥85厘米，女性腰圍≥80厘米為腹部脂肪

4、蓄積。
　　 5疾病評分標(biāo)準(zhǔn):采用RDQ量表、GERD-HRQL量表計(jì)分
　　 6疾病生活質(zhì)量評分與心理評分:采用SF-36量表計(jì)分
　　 7肥胖各相關(guān)指標(biāo)測量標(biāo)準(zhǔn):①身高:受測者赤腳，以立正姿勢（軀干挺直，上肢自然下垂，足跟并隴，足尖分開成60°）站在身高計(jì)的底板上，頭部正直，兩眼平視，足跟、骶骨及兩肩胛間與立柱接觸。檢測員站在受測者右側(cè)，調(diào)整受測者頭部，使其耳屏上緣與眼眶下緣最低點(diǎn)保持在同一水平線上，然后下移

5、水平板，輕壓在受測者頭頂，讀數(shù)并記錄。記錄以cm為單位。②體重:將體重計(jì)放在平坦地上，調(diào)整其零點(diǎn)，受測者自然站立在秤臺中央并靜止不動。至刻度尺平衡后讀數(shù)并記錄。記錄以kg為單位。③臀圍:測量時(shí)，兩腿并攏直立，兩臂自然下垂，皮尺水平放在前面的恥骨聯(lián)合和背后臀大肌最凸處。記錄以cm為單位。④腰圍:測量時(shí)，身體直立，兩臂自然下垂，不要收腹，呼吸保持平穩(wěn)，皮尺水平放在髖骨上、肋骨下最窄的部位。記錄以cm為單位。
　　 所有研究對象有統(tǒng)一

6、的調(diào)查員采用面對面的方式逐一進(jìn)行問卷調(diào)查及體格檢查，所有研究對象都簽署了知情同意書，嚴(yán)格遵守倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，并由統(tǒng)一的計(jì)分員進(jìn)行計(jì)分分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.肥胖相關(guān)指標(biāo)中BMI、腰圍、WHI與GERD的發(fā)病相關(guān)(P＜0.05)，且與WHI高度相關(guān)（P＜0.001）。
　　 2.GERD患者組生活質(zhì)量評分與心理評分低于正常組;除一般健康(GH)評分外，SF-36量表各維度評分及總分均與RDQ量表計(jì)分呈負(fù)相關(guān)，其

7、中體能影響(RP)評分與RDQ計(jì)分、身體疼痛(BP)評分與RDQ計(jì)分、社會活動(SF)評分與RDQ計(jì)分、SF-36量表總評分與RDQ計(jì)分的相關(guān)性比較具有明顯相關(guān)性(P＜0.05)。SF-36量表各維度評分及總分均與GERD-HRQL量表計(jì)分呈負(fù)相關(guān)，其中體能(PF)評分與HRQL計(jì)分、體能影響(RP)評分與HRQL計(jì)分、身體疼痛(BP)評分與HRQL計(jì)分、精力(VT)評分與HRQL評分、社會活動(SF)評分與HRQL計(jì)分、精神影響(RE

8、)評分與HRQL計(jì)分、SF-36量表總評分與HRQL計(jì)分的相關(guān)性比較具有明顯相關(guān)性(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 本研究發(fā)現(xiàn)肥胖相關(guān)指標(biāo)中BMI、腰圍、WHI與GERD的發(fā)病相關(guān)，腰圍、WHI增加為代表的腹型肥胖與GERD的關(guān)系更具密切。GERD癥狀的加重對患者的生活質(zhì)量造成了一定影響，GERD患者組生活質(zhì)量評分與心理評分均低于正常人群，癥狀的嚴(yán)重程度與患者的心身健康水平在一定程度上相關(guān)，尤其表現(xiàn)在癥狀嚴(yán)重程度對

9、患者體能、體能影響、身體疼痛、精力、社會活動、精神影響方面。
　　 第二章高脂飲食誘導(dǎo)的大鼠模型食管下段可培養(yǎng)細(xì)菌及乳桿菌種的變化的研究
　　 目的:
　　 關(guān)于GERD的發(fā)病機(jī)制目前的研究主要集中在胃食管連接部運(yùn)動異常及食管下段清除能力下降方面。有研究表明細(xì)菌不僅可以影響胃腸道平滑肌粘膜的敏感性，同時(shí)也會對平滑肌的動力產(chǎn)生影響。已發(fā)現(xiàn)肥胖者胃腸道細(xì)菌構(gòu)成與普通個體存在差異。通過細(xì)菌培養(yǎng)、變性梯度凝膠電泳(DGG

10、E)及測序的方法，以期了解高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖是否可影響食管下段的菌群組成。
　　 方法:
　　 1.高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖大鼠模型的建立20只SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1w后，隨機(jī)分為兩組，每組10只，分別為高脂飲食組和正常飲食對照組，7w末處死大鼠，通過對大鼠的體重的變化、Lee's指數(shù)、血清TG、TCH的檢測了解高脂飲食大鼠的成模情況。動物實(shí)驗(yàn)通過中南大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)倫理委員會審核。
　　 2.菌群分析方法:通過選擇性培養(yǎng)基

11、分析正常飲食及高脂飲食誘導(dǎo)下兩組SD大鼠食管下段粘膜可培養(yǎng)細(xì)菌的組成及菌群計(jì)數(shù)變化。總需氧菌:營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，金黃色葡萄球菌:高鹽甘露醇瓊脂培養(yǎng)基，放線菌:放線菌肉湯培養(yǎng)基，腸球菌:TTC瓊脂培養(yǎng)基，KF鏈球菌:KF鏈球菌瓊脂培養(yǎng)基，腸桿菌:EMB瓊脂培養(yǎng)基，總厭氧菌:厭氧菌瓊脂培養(yǎng)基，強(qiáng)化梭菌:強(qiáng)化梭菌瓊脂培養(yǎng)基，產(chǎn)氣莢膜梭菌:PY瓊脂培養(yǎng)基，乳桿菌:LBS培養(yǎng)基，雙歧桿菌: BS瓊脂培養(yǎng)基。
　　 3.利用分子生物學(xué)方法分析

12、乳桿菌種的變化:提取SD大鼠食管下段粘膜可培養(yǎng)乳桿菌DNA，并通過引物擴(kuò)增16SrDNA產(chǎn)物，使用變性梯度凝膠電泳(DGGE)分離16S rDNA產(chǎn)物，切下單獨(dú)條帶凝膠擴(kuò)增純化產(chǎn)物后測序，所得序列在GenBank數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行Blast比對分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.高脂飲食誘導(dǎo)組SD大鼠體重、Lee's指數(shù)、血清TG、TCH均明顯高于普通飲食喂養(yǎng)組SD大鼠（P＜0.05)。
　　 2.高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖SD大

13、鼠食管下段粘膜可培養(yǎng)菌群與正常飲食對照組SD大鼠食管下段粘膜可培養(yǎng)菌群存在明顯差異，具體表現(xiàn)在在高脂飲食組出現(xiàn)了金黃色葡萄球菌的缺失，總厭氧菌與乳桿菌較正常對照組均明顯減少（P＜0.05)。
　　 3.高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖SD大鼠食管下段粘膜乳桿菌菌種組成不同于普通飲食SD大鼠，具體表現(xiàn)在普通大鼠食管下段粘膜乳桿菌菌種的組成為詹氏乳桿、加氏乳桿與雷特氏乳桿，而高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖SD大鼠食管下段粘膜乳桿菌菌種的組成為卷曲乳桿、加氏乳

14、桿與雷特氏乳桿。
　　 結(jié)論:
　　 1.高脂飲食可以引起SD大鼠食管下段粘膜可培養(yǎng)菌群發(fā)生變化，具體表現(xiàn)在在高脂飲食組出現(xiàn)了金黃色葡萄球菌的缺失，總厭氧菌與乳桿菌較正常對照組均明顯減少。
　　 2.高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖SD大鼠食管下段粘膜乳桿菌菌種組成不同于普通SD大鼠，普通大鼠食管下段粘膜乳桿菌菌種的組成為詹氏乳桿、加氏乳桿與雷特氏乳桿，而高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖SD大鼠食管下段粘膜乳桿菌菌種的組成為卷曲乳桿、加氏乳