龍血竭及其成分龍血素B鎮(zhèn)痛機理的研究.pdf

1、傣藥龍血竭是一味傳統(tǒng)藥物，兼有活血化瘀和收斂止血之功效，并且具有明顯的鎮(zhèn)痛和抗炎作用，在臨床上應用極為廣泛，近幾年來，本實驗小組對龍血竭的鎮(zhèn)痛機理做了較多的研究，通過膜片鉗技術在大鼠初級感覺神經元(包括DRG和TG神經元)上研究了龍血竭對TTX-S和TTX-R鈉通道電流及辣椒素受體電流的影響。另外，還采用細胞外微電極記錄技術，研究了龍血竭及其成分對大鼠脊髓背角廣動力范圍神經元誘發(fā)放電的影響，以上研究結果說明了龍血竭從不同水平、不同機制調

2、制痛覺信息的中樞傳入，從而達到鎮(zhèn)痛效果。龍血竭對大鼠背根神經節(jié)細胞上鈉通道的調制以及龍血竭抑制大鼠脊髓背角廣動力范圍神經元的誘發(fā)放電頻率的結果表明，龍血竭能夠通過中樞和外周對痛覺信息進行調制，但缺少對龍血竭鎮(zhèn)痛活性類型的相關實驗研究。之前的研究提出了龍血竭通過干預痛覺信息阻滯神經傳導發(fā)揮其鎮(zhèn)痛效應，而DRG細胞胞體軸突的一個分支與外周坐骨神經相連，若能對坐骨神經部分進行相應的研究，則龍血竭阻滯神經信息的傳導就更具有說服力。
　　

3、 因此，本文首先對小鼠進行一系列的藥理實驗，主要采用熱板法、熱輻射法和扭體法，來判定龍血竭的鎮(zhèn)痛活性類型，通過實驗發(fā)現，0.5g/L的龍血竭在熱板法和光熱輻射甩尾法實驗中，能顯著延長小鼠的舔足潛伏期和甩尾潛伏期；在小鼠扭體法實驗中，則能顯著減小15min內出現扭體反應的次數。實驗結果表明，龍血竭既有良好的中樞鎮(zhèn)痛活性，也具有良好的外周鎮(zhèn)痛活性。
　　 其次，為驗證龍血竭產生鎮(zhèn)痛效應的藥理機制，本文將制作牛蛙坐骨神經干標本，觀察龍

4、血竭對坐骨神經動作電位的影響。通過實驗發(fā)現，0.5g/L的龍血竭使得牛蛙坐骨神經動作電位幅值降低，神經興奮不應期延長和興奮傳導速度減慢，這些實驗結果進一步確定了龍血竭阻滯神經傳導的功能，也更進一步證實了龍血竭對痛覺信息傳導的干預作用。
　　 另外，通過膜片鉗實驗研究已經發(fā)現，龍血竭及其主要成分龍血素B對與疼痛傳遞密切相關的鈉通道和辣椒素受體均有調制作用，據已有文獻報道，辣椒素能夠調制電壓門控鈉通道，抑制鈉電流，并且這種調制作用與

5、辣椒素受體有關，由于龍血素B與辣椒素具有相似的化學結構，而龍血素B對鈉通道電流也具有抑制作用，由此推測龍血素B對鈉通道電流的影響也很可能與辣椒素受體有關。弄清上述問題將使所得研究結果更具有價值，根據以上分析，本文設計以下膜片鉗實驗對龍血竭及其成分龍血素B的鎮(zhèn)痛機理進行深入研究。
　　 基于龍血素B在調制辣椒素受體和鈉通道上與辣椒素的相似性。本文最后采用全細胞膜片鉗技術，在DRG細胞上進行龍血素B調制鈉通道與辣椒素受體的關系研究，

6、并探討龍血素B和辣椒素的相互作用關系。通過實驗得到以下結果：
　　 1、龍血素B和辣椒素的組合對鈉電流的抑制率比各自單獨作用時要高。
　　 2、龍血素B和辣椒素共同作用時，當固定其中任何一種藥物的濃度，而改變另一種藥物的濃度時，激活曲線向去極化方向偏移的程度和加速鈉通道失活的程度都會隨著這種藥物濃度的增大而減小。
　　 3、通過藥物相互作用分析得出龍血素B和辣椒素調制鈉通道時具有拮抗作用。以上結果也表明龍血素B對