大鼠運(yùn)動(dòng)性骨關(guān)節(jié)損傷模型構(gòu)建及炎性通路相關(guān)因子差異表達(dá)和干預(yù)研究.pdf

1、研究目的：構(gòu)建大鼠運(yùn)動(dòng)性骨關(guān)節(jié)損傷模型，并在此模型以布洛芬作為陽(yáng)性對(duì)照，觀察運(yùn)動(dòng)性骨關(guān)節(jié)損傷的可能分子機(jī)制及HWTX—Ⅰ的抗傷害效應(yīng)，為運(yùn)動(dòng)性骨關(guān)節(jié)損傷發(fā)生和發(fā)展的分子機(jī)制提供新的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 研究方法：5—6周齡健康雄性SD大鼠96只，隨機(jī)分為早期生理鹽水組(n=16)、早期HWTX—Ⅰ用藥組(n=16)、早期布洛芬用藥組(n=16)、晚期生理鹽水組(n=16)、晚期HWTX—Ⅰ用藥組(n=16)、晚期布洛芬用藥組(

2、n=16)。采用改良Hulth模型結(jié)合間歇性中低強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)建立大鼠運(yùn)動(dòng)骨關(guān)節(jié)損傷病理模型，用本課題組建立的大鼠硬脊膜外腔置管手術(shù)方法，通過(guò)光鏡觀察運(yùn)動(dòng)性骨關(guān)節(jié)損傷膝關(guān)節(jié)軟骨形態(tài)學(xué)變化；分光光度法測(cè)定血清中SOD、CAT、GS—Px活力及NO含量；RT—PCR法檢測(cè)膝關(guān)節(jié)軟骨中TNF—α、IL—1β、IL—6、MMP—8以及MMP—13mRNA的表達(dá)水平。
　　 研究結(jié)果：
　　 (1)HE染色光鏡觀察發(fā)現(xiàn)早期生理鹽水組膝關(guān)

3、節(jié)軟骨組織的潮線消失，軟骨細(xì)胞排列較為紊亂，大量軟骨細(xì)胞固縮；早期布洛芬用藥組膝關(guān)節(jié)軟骨組織的潮線不齊，軟骨細(xì)胞排列不齊，少量軟骨細(xì)胞固縮；早期HWTX—I用藥組膝關(guān)節(jié)軟骨組織結(jié)構(gòu)較另外兩組更接近正常組織。晚期生理鹽水組膝關(guān)節(jié)軟骨表面出現(xiàn)關(guān)節(jié)裂隙，潮線消失，軟骨細(xì)胞排列較紊亂；晚期布洛芬用藥組膝關(guān)節(jié)軟骨組織潮線不齊，軟骨細(xì)胞排列不齊，可見(jiàn)軟骨細(xì)胞有少量空泡；晚期HWTX—Ⅰ用藥組膝關(guān)節(jié)軟骨組織結(jié)構(gòu)正常，潮線較整齊，軟骨細(xì)胞排列比較一致，

4、有少量軟骨細(xì)胞固縮。
　　 (2)分光光度法測(cè)定大鼠血清中NO含量及CAT、GSH—Px、SOD活力，血清中CAT、GSH—Px、SOD活力以HWTX—Ⅰ用藥組最高，布洛芬用藥組、生理鹽水組隨之降低；血清中CAT活力以生理鹽水組最低；血清中NO以生理鹽水組最高，布洛芬用藥組、HWTX—Ⅰ用藥組隨之降低。
　　 (3)RT—PCR法檢測(cè)滑膜組織和軟骨細(xì)胞中TNF—α、IL—1β、IL—6、MMP—8、MMP—13 mRNA

5、的表達(dá)水平。其結(jié)果均以生理鹽水組最高，布洛芬用藥組次之，HWTX—Ⅰ用藥組最低。布洛芬用藥組、HWTX—Ⅰ用藥組與生理鹽水組之間存在顯著性差異(P<0．01)。
　　 結(jié)論：
　　 (1)我們參照Hulth模型改建了大鼠運(yùn)動(dòng)性骨關(guān)節(jié)損傷模型，模擬了運(yùn)動(dòng)員膝關(guān)節(jié)運(yùn)動(dòng)性骨關(guān)節(jié)損傷狀態(tài)。為HWTX—Ⅰ的抗傷害作用研究提供了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。
　　 (2)形態(tài)學(xué)觀察表明HWTX—Ⅰ硬脊膜外腔用藥，對(duì)大鼠運(yùn)動(dòng)性骨關(guān)節(jié)損傷起到明

6、顯的抗損傷和保護(hù)作用，其抗傷害效果要優(yōu)于布洛芬。
　　 (3)HWTX—Ⅰ硬脊膜外腔用藥可以下調(diào)大鼠血清中NO含量，上調(diào)運(yùn)動(dòng)性骨關(guān)節(jié)損傷大鼠血清中CAT、GSH—Px、SOD活力，從而通過(guò)減輕自由基對(duì)運(yùn)動(dòng)性骨關(guān)節(jié)損傷的影響。
　　 (4)HWTX—Ⅰ硬脊膜外腔用藥可下調(diào)運(yùn)動(dòng)性骨關(guān)節(jié)損傷軟骨滑膜中炎性細(xì)胞因子TNF—α、IL—1β、IL—6、MMP—8、MMP—13 mRNA的表達(dá)。其抗炎效果相對(duì)于目前臨床使用的鈣通道拮抗