槲皮素干預(yù)K562-A02細(xì)胞多藥耐藥基因及HSP70表達(dá)的研究.pdf

1、上海第二醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文槲皮素干預(yù)K562A02細(xì)胞多藥耐藥基因及HSP70表達(dá)的研究姓名：矯強(qiáng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：血液病學(xué)指導(dǎo)教師：歐陽(yáng)仁榮趙勁秋2002.5.1上海第二醫(yī)科大學(xué)碩士論文第一部分槲皮素對(duì)K562／A02細(xì)胞多藥耐藥基因及P糖蛋白表達(dá)的影響ff方法用終濃度為o5umol／L、1umol／L、5pmol／L、10umol／L、50um01／L、100um01／L的槲皮素處理K562／A02細(xì)胞，24小時(shí)后，用RT—

2、PCR方法檢測(cè)mdrl基因表達(dá)，流式細(xì)胞儀檢測(cè)Pgp含量變化。結(jié)果10umol／L以下濃度處理組mdrl基因表達(dá)與空白對(duì)照無(wú)顯著差異，50lamol／L、100umol／L濃度處理組mdrl基因表達(dá)較空白對(duì)照相比明顯下調(diào)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)Pgp：陰性對(duì)照(K562敏感株)幾乎沒(méi)有熒光標(biāo)記：不加槲皮素的K562／A02細(xì)胞，熒光標(biāo)記顯示強(qiáng)陽(yáng)性：經(jīng)05—1ooumol／l槲皮素處理的K562／A02細(xì)胞，熒光標(biāo)記顯示部分陽(yáng)性，且有隨濃度增加而

3、減弱的趨勢(shì)。夕’、r強(qiáng)冤結(jié)論：(1)較高濃度的槲皮素可下調(diào)K562／A02細(xì)胞mdrl基因的表達(dá)。(2)槲皮素可下調(diào)K562／A02細(xì)胞Pgp的表達(dá)。第二部分槲皮素對(duì)K562A／02細(xì)胞株70KD熱休克蛋白mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)的影響廠f方法分別于熱處理前后在培養(yǎng)液中加入終濃度為10umol／L的槲＼皮素，并設(shè)對(duì)照組，于熱處理后即刻、2、4、6小時(shí)收集樣品，用RT～PCR方法檢測(cè)HSP70基因表達(dá)，Westernblot方法檢測(cè)HSP70

4、蛋白表達(dá)。結(jié)果熱休克處理明顯增加K562／A02細(xì)胞HSP70基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)；熱處理前在培養(yǎng)液中加入終濃度為10umol／L的槲皮素，HSP70基因及蛋白表達(dá)較單純熱處理組均有顯著下調(diào)；熱處理后在培養(yǎng)液中加入終濃度為1011mol／L的槲皮素，HSP70基因及蛋白表達(dá)較單純熱處理組無(wú)明顯變化。)—／／結(jié)論(1)熱休克處理明顯增加K562／A02細(xì)胞HSP70基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)。(2)槲皮素能夠抑制K562／A02細(xì)胞HSP70基因及