槲皮素逆轉白血病細胞株K562-ADM和HL-60-ADM多藥耐藥的研究.pdf

1、多年以來人們一直試圖尋找理想的耐藥逆轉劑(也稱為化療增敏劑).象維拉帕米、環(huán)孢菌素A等經(jīng)典的多藥耐藥調節(jié)劑往往在達到有效逆轉濃度之前就產(chǎn)主了嚴重的難以耐受的毒副反應而限制了在臨床的實際應用.近來,一些學者對抑制腫瘤的傳統(tǒng)中藥及其有效成分發(fā)生了濃厚的興趣,因為它們具有低毒性的特點,其中槲皮素是一種天然黃酮類化合物,廣泛分布于蔬菜和水果中并具有抗氧化、抗凝、擴血管等多種生物活性.最近有人發(fā)現(xiàn)它能抑制白血病細胞的生長、促進細胞凋亡,尤其是能夠

2、逆轉多藥耐藥現(xiàn)象而逐漸受到重視.在該研究中我們試圖闡明槲皮素逆轉多藥耐藥的機制,分為三個部分:(一)運用MTT法檢測柔紅霉素對白血病細胞株的敏感性(以半數(shù)抑制率表達),發(fā)現(xiàn)耐藥株對柔紅霉素的敏感性明顯低于敏感株,而經(jīng)槲皮素預處理后耐藥株對柔紅霉素的半數(shù)抑制率明顯降低從而提高了對柔紅霉素敏感性;(二)用半定量RT-PCR法檢測各細胞株中MDR<,1>和MRP<,1>耐藥基因的表達情況,結果表明K562/ADM和HL-60/ADM細胞中分別

3、有MDR<,1>和MRP<,1>的過量表達,槲皮素能夠下調這些基因的表達;利用抗P-gp和MRP<,1>的單克隆抗體通過流式細胞儀檢測P-gp和MRP<,1>耐藥蛋白的表達情況,也發(fā)現(xiàn)槲皮素也能夠劑量依賴性的抑制耐藥蛋白在細胞膜上的表達;(三)利用柔紅霉素本身特有的熒光,通過激光共聚焦顯微鏡發(fā)現(xiàn)耐藥株中細胞內熒光信號明顯減少,而經(jīng)槲皮素處理后逐漸恢復到接近敏感株細胞的水平,表明槲皮素能直接抑制P-gp和MRP<,1>的功能,恢復柔紅霉素