抗體純化工藝中蛋白與配基相互作用的研究.pdf

1、針對治療型單克隆抗體純化工藝中的關(guān)鍵問題，本論文利用表面等離子體共振(SPR)技術(shù)研究了疏水電荷誘導(dǎo)層析(HCIC)配基與抗體蛋白質(zhì)的相互作用，對于表面和溶液的多種因素對相互作用的影響進(jìn)行了考察。
　　采用自組裝技術(shù)在金襯底上構(gòu)建了兩種不同密度的HCIC配基表面模型。分別利用X射線光電子能譜(XPS)、X射線吸收精細(xì)結(jié)構(gòu)(NEXAFS)、接觸角和表面等離子體共振(SPR)對表面化學(xué)與結(jié)構(gòu)、離子化和蛋白質(zhì)結(jié)合進(jìn)行了考察。采用SPR技

2、術(shù)系統(tǒng)研究配基密度和溶液因素（如鹽濃度、pH值）對抗體和白蛋白吸附的影響。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，配基密度對相互作用的熱力學(xué)和動力學(xué)都有影響。值得注意的是，高配基密度能夠提高結(jié)合強(qiáng)度，增大吸附速率，降低解離速率并會導(dǎo)致特異性降低。在中性條件下，疏水作用和氫鍵作用都對蛋白質(zhì)吸附有很大的貢獻(xiàn)，而在酸性條件下則會被靜電排斥力超過。
　　此外，本論文通過利用配基對鐵磁性納米顆粒進(jìn)行修飾構(gòu)建了新穎的抗體蛋白分離體系，該體系易于小量、快速分離抗體