膽道阻塞后大鼠肝臟中法尼酯衍生物X受體基因表達變化及意義.pdf

1、法尼酯衍生物X受體(farnesoid X receptor,FXR)是重要的孤兒核受體之一,主要在肝臟中表達。由于生理水平的膽汁酸是FXR的內源性配體,因此FXR對膽汁酸和膽固醇穩(wěn)態(tài)有重要的調節(jié)作用?？刂颇懼岬暮铣珊娃D運,防止肝細胞內膽汁酸的過度堆積可改善和治療與膽汁酸代謝相關疾病。
　　 在正常生理狀態(tài)下,FXR可通過與靶基因啟動子上的FXR反應元件的結合,使一系列參與調節(jié)膽汁酸和膽固醇代謝的基因發(fā)生表達變化,從而影響機體

2、的膽汁酸和膽固醇代謝。隨著FXR內源性配體和FXR分子結構與功能研究進展,人們發(fā)現(xiàn)FXR的激動劑和拮抗劑可通過干預膽汁酸的合成、轉運和吸收,治療膽汁淤積性肝病。目前已知的FXR有效內源性配體有:鵝脫氧膽酸(chenodeoxycholic acid,CDCA)、石膽酸(lithocholicacid,LCA)、脫氧膽酸(desoxycholic acid,DCA)和膽酸(cholic acid,CA),而又以CDCA激活作用最明顯。

3、r>　　 阻塞性黃疸(簡稱阻黃)是由肝內、外膽管的機械性損傷使膽汁酸在肝內瘀積所導致的全身多系統(tǒng)臨床病癥。阻黃時,由于膽汁酸不能排出腸道,使正常膽汁酸肝腸循環(huán)受阻,血清中膽汁酸含量升高,刺激FXR表達上調。近來發(fā)現(xiàn),膽道阻塞后,隨阻塞時間的延長,FXR表達減弱。因此,研究膽道阻塞后肝臟中的FXR基因表達,搞清膽道阻塞過程與FXR表達的變化關系,對阻塞性黃疸的臨床治療具有十分重要的意義。
　　 目的:探討應用FXR藥物治療肝膽疾

4、病的可行性,證明FXR作為治療阻塞性黃疸疾病的新型藥物靶點,發(fā)現(xiàn)FXR靶基因的新型激動劑,為治療膽汁淤積性疾病奠定了實驗基礎。
　　 方法:通過建立大鼠膽管阻塞模型,觀察大鼠膽管阻塞1d、3d、7d和14d四個時段的肝臟組織形態(tài)學改變;檢測這四個不同時段的大鼠血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽紅素(TB)和總膽汁酸(TBA)等血液生化指標;通過免疫組化方法觀察大鼠膽管阻塞不

5、同時段的FXR表達變化,同時利用上述方法研究CDCA在大鼠膽管阻塞進程中的作用。
　　 結果:大鼠膽管阻塞后,隨時間延長肝內血管充血,細胞腫脹變性;肝內膽管擴張,纖維組織增生,但14d后癥狀有所緩解;隨大鼠膽管阻塞時間延長,血清中ALT(858.55±299.02,928.57±349.24,1031.58±354.08,986.17±34.22)、AST(354.56.±99.10,381.62±148.89,438.67±1

6、07.87,294.59±17.83)、ALP(557.33±41.86,673.33±18.27,868.42±177.60,795.83±73.37)、TB(106.67±59.46,133.58±17.69,147.13±22.59,135.87±6.53)和TBA(92.33±42.89,184.68±37.67,277.58±35.87,253.85±20.06)明顯升高。第7d達到峰值,與對照組相比差異有顯著性(P＜0.05

7、),第14d后均明顯下降;CDCA可不同程度的降低大鼠血清中ALT(745.32±177.10、839.94±48.40、934.54±22.81、873.17±31.15)、AST(312.83±77.33、356.54±84.54、430.35±50.01、192.64±34.52)、ALP(466.83±48.57、551.69±36.78、648.38±65.47、587.23±58.46)、TB(79.42±12.54、100

8、.55±45.12、107.33±57.48、112.65±33.06)和TBA(63.55±8.12、124.61±32.41、154.35±5.52、156.05±22.02)的水平。另外,隨大鼠膽管阻塞時間的延長,FXR表達上調,第7d最為明顯。CDCA治療可明顯減輕大鼠膽管阻塞后所致的肝臟損傷,CDCA可抑制FXR的表達上調。
　　 結論:膽管阻塞可導致肝損傷和肝纖維化,其程度和血清中的ALT和AST水平呈密切相關。膽道