SHARPIN在HSV-1感染性面癱小鼠腦干中的動(dòng)態(tài)表達(dá)及糖皮質(zhì)激素對(duì)其的抑制作用.pdf

1、目的:
　　1.建立Ⅰ型單純皰疹病毒（herpes simplex virus type1，HSV-1）導(dǎo)致小鼠面癱的動(dòng)物模型。
　　2.探討SHARPIN與HSV-1介導(dǎo)的面癱小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)中的動(dòng)態(tài)表達(dá)變化。
　　3.探討糖皮質(zhì)激素對(duì)HSV-1介導(dǎo)的面癱小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)中SHARPIN表達(dá)的作用。
　　方法:
　　142只四周齡Balb/c小鼠隨機(jī)分為三組:病毒接種組(n=108)，生理鹽水組(n=

2、25)和正常對(duì)照組(n=9)。其中病毒接種組中發(fā)生面癱的小鼠進(jìn)一步分為三個(gè)亞組（A-C組）。A組不進(jìn)行干預(yù)，B、C組小鼠進(jìn)行藥物干預(yù)，干預(yù)藥物為甲基潑尼松龍丁二酸鈉(methylprednisolone sodium succinate，MPSS)和糖皮質(zhì)受體阻斷劑(RU486)。B組面癱小鼠為MPSS干預(yù)組，在面癱發(fā)生后的2天內(nèi)每天腹腔注射MPSS一次，C組面癱小鼠聯(lián)合使用MPSS+RU486干預(yù)，在面癱發(fā)生后每天腹腔注射MPSS和R

3、U486各一次。通過(guò)在小鼠耳廓后接種HSV-1誘發(fā)面癱癥狀，評(píng)估小鼠面神經(jīng)功能，獲取腦干面神經(jīng)核團(tuán)組織分別用real-time PCR，Western Blot和免疫熒光技術(shù)檢測(cè)小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)中SHARPIN的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　病毒接種組小鼠69只(63.89％)于接種后2-5天出現(xiàn)不同程度的面癱癥狀。免疫熒光檢測(cè)結(jié)果顯示，面癱后2天SHARPIN蛋白在小鼠腦干面神經(jīng)核團(tuán)中表達(dá)較正常對(duì)照組明顯增強(qiáng)。SHARPIN

4、mRNA的表達(dá)在正常對(duì)照組小鼠腦干中處于低表達(dá)狀態(tài)，在病毒接種組腦干中SHARPIN mRNA6h后表達(dá)開(kāi)始升高(p＜0.05)，面癱2天后出現(xiàn)表達(dá)高峰(p＜0.01)，隨后下降，7天時(shí)降至正常水平。SHARPIN蛋白的表達(dá)趨勢(shì)和mRNA表達(dá)變化一致。在HSV-1+MPSS組，SHARPIN蛋白的表達(dá)在面癱后第2天明顯下降。在HSV-1+MPSS+RU486組，MPSS對(duì)SHARPIN蛋白表達(dá)的抑制作用被減弱。
　　結(jié)論: