骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)的骨髓微環(huán)境重塑及其在多發(fā)性骨髓瘤發(fā)病中的作用.pdf

1、[目的]
　　 在體外不同共培養(yǎng)體系中觀察多發(fā)性骨髓瘤(MM)細(xì)胞對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMMSCs)增殖、分化潛能、基因表達(dá)及細(xì)胞因子表達(dá)的影響；并分析正常人BMMSCs與MM細(xì)胞相互作用后，對(duì)MM細(xì)胞周期及細(xì)胞間隙連接蛋白(connexin，Cx)基因Cx43、Cx45表達(dá)的影響；探討MM細(xì)胞能否在體外誘導(dǎo)正常BMMSCs出現(xiàn)類似MM-BMMSCs樣異常及BMMSCs對(duì)MM細(xì)胞GJIC功能的影響。
　　 [方法]

2、>　　 驗(yàn)分為三組：對(duì)照組，間接共培養(yǎng)組及U266條件培養(yǎng)基(U266-CM)直接共培養(yǎng)組，MM細(xì)胞與BMMSCs在體外經(jīng)不同培養(yǎng)體系共培養(yǎng)后行細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測BMMSCs增殖能力的變化；VonKossa染色觀察BMMSCs成骨分化潛能的變化；RT-PCR檢測MM細(xì)胞對(duì)BMMSCs基因RANKL/OPG、IL-1β、DKK1表達(dá)及細(xì)胞因子SDF-1α、IGF-1表達(dá)的影響；PI染色流式細(xì)胞術(shù)(FCM)分析BMMSCs對(duì)MM細(xì)胞周期的影響，

3、RT-PCR檢測BMMScs與MM細(xì)胞相互作用后MM細(xì)胞Cx43、Cx45基因表達(dá)的變化。
　　 [結(jié)果]
　　 BMMSCs與MM細(xì)胞間接共培養(yǎng)及與U266-CM直接共培養(yǎng)后增殖能力無明顯變化；VonKossa染色提示兩共培養(yǎng)組BMMSCs成骨分化潛能較差，礦化基質(zhì)沉積較正常對(duì)照組少；BMMSCs與MM細(xì)胞共培養(yǎng)24h后共培養(yǎng)組RANKL、IL-1β、DKK1基因表達(dá)上調(diào)，OPG基因表達(dá)下調(diào)；細(xì)胞因子SDF-1表達(dá)下調(diào)

4、、IGF-1上調(diào)；BMMSCs與MM細(xì)胞直接及間接共培養(yǎng)后，F(xiàn)CM檢測提示共培養(yǎng)組MM細(xì)胞S期細(xì)胞比例增高，間接共培養(yǎng)組MM細(xì)胞Cx43表達(dá)無明顯變化，但直接共培養(yǎng)組MM細(xì)胞Cx43表達(dá)明顯減低，Cx45兩共培養(yǎng)組與對(duì)照組無明顯差異。
　　 [結(jié)論]
　　 MM細(xì)胞與BMMSCs體外共培養(yǎng)可以誘導(dǎo)BMMSCs發(fā)生改變，MM細(xì)胞可以抑制BMMSCs成骨分化潛能，破骨活化及成骨抑制基因表達(dá)增加，這與MM-BMMSCs相似，說