骨髓瘤細胞誘導的骨髓微環(huán)境重塑及其在多發(fā)性骨髓瘤發(fā)病中的作用.pdf

1、[目的]
　　 在體外不同共培養(yǎng)體系中觀察多發(fā)性骨髓瘤(MM)細胞對骨髓間充質(zhì)干細胞(BMMSCs)增殖、分化潛能、基因表達及細胞因子表達的影響；并分析正常人BMMSCs與MM細胞相互作用后，對MM細胞周期及細胞間隙連接蛋白(connexin，Cx)基因Cx43、Cx45表達的影響；探討MM細胞能否在體外誘導正常BMMSCs出現(xiàn)類似MM-BMMSCs樣異常及BMMSCs對MM細胞GJIC功能的影響。
　　 [方法]

2、>　　 驗分為三組：對照組，間接共培養(yǎng)組及U266條件培養(yǎng)基(U266-CM)直接共培養(yǎng)組，MM細胞與BMMSCs在體外經(jīng)不同培養(yǎng)體系共培養(yǎng)后行細胞計數(shù)檢測BMMSCs增殖能力的變化；VonKossa染色觀察BMMSCs成骨分化潛能的變化；RT-PCR檢測MM細胞對BMMSCs基因RANKL/OPG、IL-1β、DKK1表達及細胞因子SDF-1α、IGF-1表達的影響；PI染色流式細胞術(shù)(FCM)分析BMMSCs對MM細胞周期的影響，

3、RT-PCR檢測BMMScs與MM細胞相互作用后MM細胞Cx43、Cx45基因表達的變化。
　　 [結(jié)果]
　　 BMMSCs與MM細胞間接共培養(yǎng)及與U266-CM直接共培養(yǎng)后增殖能力無明顯變化；VonKossa染色提示兩共培養(yǎng)組BMMSCs成骨分化潛能較差，礦化基質(zhì)沉積較正常對照組少；BMMSCs與MM細胞共培養(yǎng)24h后共培養(yǎng)組RANKL、IL-1β、DKK1基因表達上調(diào)，OPG基因表達下調(diào)；細胞因子SDF-1表達下調(diào)

4、、IGF-1上調(diào)；BMMSCs與MM細胞直接及間接共培養(yǎng)后，F(xiàn)CM檢測提示共培養(yǎng)組MM細胞S期細胞比例增高，間接共培養(yǎng)組MM細胞Cx43表達無明顯變化，但直接共培養(yǎng)組MM細胞Cx43表達明顯減低，Cx45兩共培養(yǎng)組與對照組無明顯差異。
　　 [結(jié)論]
　　 MM細胞與BMMSCs體外共培養(yǎng)可以誘導BMMSCs發(fā)生改變，MM細胞可以抑制BMMSCs成骨分化潛能，破骨活化及成骨抑制基因表達增加，這與MM-BMMSCs相似，說