高氧致新生鼠CLD肺組織中核因子-κB表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化.pdf

1、 目的：本實(shí)驗(yàn)以高氧誘導(dǎo)的新生鼠CLD模型為研究對象，應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法，旨在闡明NF-κBp65與其抑制蛋白IκBα在新生鼠CLD發(fā)生發(fā)展中的動(dòng)態(tài)變化，從而探討其發(fā)病機(jī)制。 方法：實(shí)驗(yàn)組將足月的SD大鼠(連同母鼠)生后即置于氧箱中，持續(xù)輸入氧氣，維持FiO2為0.90(美國OM-25ME型測氧儀監(jiān)測)，用鈉石灰吸收CO2，使其濃度＜0.5﹪(Dapex氣體分析儀)，溫度22℃～25℃，濕度50﹪～70﹪，每天定時(shí)開箱0.5

2、小時(shí)，添加水、飼料及更換墊料，并與對照組交換母鼠以避免因氧中毒而致其喂養(yǎng)能力下降。對照組FiO2為0.21(即空氣)，具體方法及實(shí)驗(yàn)控制因素同實(shí)驗(yàn)組。于實(shí)驗(yàn)后的1d，3d，7d，14d和21d各組分別隨機(jī)處死8只仔鼠，留取左肺組織，置于中性福爾馬林固定48h，逐級(jí)乙醇脫水，二甲苯透明，浸蠟，石蠟包埋，常規(guī)制備4μm厚的組織切片，H.E.染色。應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)(SABC法)檢測肺組織內(nèi)NF-κBp65、IκBα蛋白的定位及表達(dá)。