陽離子脂質(zhì)體吸附FLT3L基因腫瘤原位注射聯(lián)合順鉑治療小鼠結(jié)腸癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:生物-化療即傳統(tǒng)的化治療與生物治療相結(jié)合的方法,是目前惡性腫瘤綜合治療的發(fā)展方向.在生物治療當(dāng)中,以免疫細(xì)胞靶向的基因治療策略則是目前腫瘤生物治療臨床研究的熱點(diǎn)之一.F1t3L(Flt3 ligand,FL)是一種新近發(fā)現(xiàn)并克隆的、能夠刺激早期造血的細(xì)胞因子<'8>(cytokine).該因子通過與造血干細(xì)胞(HSC)以及早期免疫細(xì)胞表面酪氨酸激酶受體3(Flt3)結(jié)合,刺激造血干細(xì)胞(HSC)的增殖和分化<'20>,還能促進(jìn)體內(nèi)

2、淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞(DC)、自然殺傷(NK)細(xì)胞增殖、分化和成熟,其中Flt3L對(duì)DC的生成具有明顯的協(xié)同作用<'17.18>;若與其它細(xì)胞因子合用,FL的作用還可以得到明顯加強(qiáng).因其具有刺激造血和調(diào)節(jié)免疫的雙重作用,故在激發(fā)有效的抗腫瘤免疫<'30>、造血干細(xì)胞動(dòng)員<'22>、保護(hù)大劑量放化療對(duì)骨髓的損傷<'21.26>、方面有良好的臨床應(yīng)用前景.該實(shí)驗(yàn)采用BALB/c小鼠建立結(jié)腸癌模型,鼠可溶性Flt3L真核表達(dá)質(zhì)粒用陽離子脂質(zhì)體

3、吸附后,在荷瘤小鼠瘤內(nèi)進(jìn)行原位注射,在腫瘤局部表達(dá)后通過與免疫細(xì)胞表面的Flt3受體結(jié)合,在腫瘤局部激發(fā)有效的抗腫瘤免疫,從而達(dá)到抑制腫瘤生長(zhǎng)的目的;并同時(shí)聯(lián)合使用化療藥物(順鉑),探討Flt3L基因腫瘤原位注射聯(lián)合化療臨床治療腫瘤的可行性.材料和方法:在6-8周齡的雌性BALB/c小鼠建立CT26結(jié)腸癌實(shí)體瘤模型;小鼠右側(cè)腋下接種CT26結(jié)腸腺癌細(xì)胞2×10<'5>,1周后待腫瘤生長(zhǎng)到直徑約1~2毫米時(shí),將荷瘤小鼠隨機(jī)分為4組,每組1

4、0只:A對(duì)照組:生理鹽水0.1ml/只,瘤內(nèi)注射,每周2次,連續(xù)2周;B化療組:順鉑(2mg/Kg小鼠LDs的1/3),0.1ml/只,腹腔內(nèi)注射,每周一次,連續(xù)兩次;C基因治療組(FL組):陽離子脂質(zhì)體吸附Flt3L質(zhì)粒(1mg/ml)0.1ml/只,瘤內(nèi)注射,每周2次,連續(xù)2周;D聯(lián)合治療組:劑量分別同B組與C組,其中陽離子脂質(zhì)體吸附Flt3L質(zhì)粒于腫瘤接種后第7、9、11、14天注射,化療于第8、15天注射.觀察小鼠腫瘤大小,腫瘤