下調(diào)REV3L基因表達(dá)逆轉(zhuǎn)結(jié)腸癌細(xì)胞耐藥性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討靶向下調(diào)跨損傷DNA合成途徑(Translesion DNA Synthesis，TLS)中關(guān)鍵基因REV3L對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用。
　　方法：利用RNA干擾技術(shù)靶向下調(diào)REV3L基因在人高分化耐奧沙利鉑結(jié)腸癌細(xì)胞系（THC8307/L-OHP）中的表達(dá)，以實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）和免疫細(xì)胞化學(xué)分別從mRNA及蛋白水平檢測(cè)REV3L基因下調(diào)情況。以基因低表達(dá)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性的細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)組。運(yùn)用甲基噻

2、唑藍(lán)四氮唑鹽法（MTT）、流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞形態(tài)學(xué)等方法，檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組和兩個(gè)對(duì)照組腫瘤細(xì)胞耐藥增敏、耐藥性相對(duì)逆轉(zhuǎn)的情況以及細(xì)胞凋亡等指標(biāo)。
　　結(jié)果：轉(zhuǎn)染質(zhì)粒mU6pro-siREV3的耐藥性結(jié)腸癌細(xì)胞其REV3L基因表達(dá)被成功抑制，檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)結(jié)果顯示：①實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞對(duì)奧沙利鉑的敏感性增強(qiáng)，耐藥系數(shù)明顯低于空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組；②實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞基因調(diào)控后，耐藥性的相對(duì)逆轉(zhuǎn)率顯著高于陰性對(duì)照組；③實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的細(xì)胞凋亡率顯著高于兩個(gè)對(duì)照組