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文檔簡介
1、目的:研究單胺氧化酶抑制劑苯乙肼在體外對套細胞淋巴瘤Jeko-1細胞組蛋白甲基化及Wnt信號通路的影響,探討其可能的作用機制。
方法:(1)應用MTT比色法檢測苯乙肼對Jeko-1細胞增殖抑制率的影響;流式細胞術觀察細胞凋亡的變化。(2)應用蛋白免疫印跡法(Western Blot)觀察苯乙肼作用后Jeko-1細胞的凋亡相關蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax及P21蛋白表達水平的變化,組蛋白H3K4單甲基化、雙甲基化、
2、三甲基化及組蛋白H3乙?;癄顟B(tài)的變化。同時研究Wnt信號轉導通路相關蛋白表達水平的變化。
結果:(1)單胺氧化酶抑制劑苯乙肼抑制Jeko-1細胞增殖,苯乙肼5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L作用24 h后,Jeko-1細胞增殖抑制率分別為(10.43±1.85)%、(36.54±4.34)%、(43.52±3.37)%、(80.05±3.56)%,P<0.05;隨濃度的增加,細胞增殖抑制率不斷
3、增加。(2)苯乙肼可上調細胞凋亡相關蛋白Bax,表達凋亡及執(zhí)行蛋白procaspase-3,細胞周期蛋白依賴性激酶抑制蛋白P21表達,下調抗凋亡蛋白Bcl-2;苯乙肼濃度分別為0μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L作用24小時后,Jeko-1細胞的凋亡率分別為(3.64±1.52)%、(17.64±3.46)%、(30.14±3.16)%、(52.45±5.31)%,隨著苯乙肼濃度的增加,凋亡率逐漸上升,表現(xiàn)
4、為濃度依賴性。(3)苯乙肼上調Jeko-1細胞組蛋白H3K4me1、H3K4me2甲基化水平及H3乙?;?,而組蛋白H3K4me3水平無明顯改變。(4)苯乙肼處理24小時后Jeko-1細胞的 WNT通路蛋白p-GSK-3β、β-catenin、c-myc、cyclinD1表達均下降。
結論:(1)單胺氧化酶抑制苯乙肼能明顯抑制Jeko-1細胞的增殖,可能與上調P21有關。(2)苯乙肼可誘導Jeko-1細胞凋亡,可能與下調Bc
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