人工蠶絲韌帶復合骨髓間充質干細胞修復前交叉韌帶損傷的實驗研究.pdf

1、分類號：泰山匿虧弦碩士學位論文論文題目：人工蠶絲韌帶復合骨髓間充質干細胞修復前交叉韌帶損傷的實驗研究作 者 姓 名：楊繼祥學 科、專 業(yè)：外科學學 位 類 型：科學學位研 究 方 向：骨科學指 導 教 師：賈慶衛(wèi)副教授入 學 時 問：2 0 1 0 年9 月論文工作起止時問：2 0 1 2 年2 月～2 0 1 3 年3 月愀刪人工蠶絲韌帶復合骨髓間充質干細胞修復前交叉韌帶損傷的實驗研究研究生：楊繼祥專業(yè)：骨外科學導師：賈慶衛(wèi)副教授中文

2、摘要目的人工蠶絲韌帶( A r t i f i c i a ls i l k l i g a m e n t ) 作為生物材料支架，具有良好的生物相容性，沒有細胞毒性，并不引起炎性反應，在組織工程己被廣泛應用。蠶絲脫膠后，經多種方法增大人工蠶絲韌帶的孔隙率，提高其與外周事物接觸的表面積，進而增加骨髓間充質干細胞( B M S C s ) 在蠶絲韌帶上的粘附率。通過一定濃度骨髓間充質干細胞在人工蠶絲蠶絲韌帶上貼附生長，制成復合生物材料，替

3、代新西蘭大白兔的前交叉韌帶( A C L ) ，在膝關節(jié)微環(huán)境和動力作用下，觀察復合材料的轉變，并與正常韌帶做對比。為人工肌腱和韌帶等組織工程材料的制作提供一定的可行性。I ．實驗流程1 ．1 制作人工蠶絲韌帶，用胰酶或碳酸鈉進行脫膠，然后與I 型膠原蛋白復合，進行冷凍干燥，再以E D C ( 1 ．乙基．3 郫．二甲基氨丙基) 碳二亞胺) ／N H S ( N 習陘基琥珀酰亞胺) 作為交聯(lián)試劑進行膠原的交聯(lián)，再次冷凍干燥，環(huán)氧乙烷滅菌

4、備用。1 ．2 選取約一周左右新西蘭小白兔，取其骨髓間充質干細胞，傳代培養(yǎng)并行流式細胞儀檢測細胞種類。取第四代細胞，與備用的人工蠶絲韌帶復合7 天，形成復合材料。1 ．3 封閉群養(yǎng)新西蘭大白兔3 6 只，隨機分為3 組( 空白組，實驗組和對照組) ，每組1 2 只。在相同條件下分別去除其前交叉韌帶，保留殘端。在實驗組中，用復合材料重建A C L 。2 ．觀察指標2 ．1 不同預定時間各組分別隨機處死4 只動物，觀察復合材料組織學、病理學