125I-AIBZM納米脂質(zhì)體腦顯像劑的研究.pdf

1、許多中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病如帕金森病、阿爾茨海默病等，與腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺異常有關(guān)，因此了解多巴胺的變化對此類中樞神經(jīng)疾病的診療、預(yù)后觀察及疾病機(jī)理研究有重要意義。通過放射性腦受體顯像技術(shù)可以了解多巴胺受體信息，進(jìn)而推斷多巴胺的信息變化。苯甲酰胺類衍生物125碘-(S)-N-(1-乙基-2-吡咯烷基)甲基-4-氨基-2-甲氧基苯酰胺(125I-AIBZM)與多巴胺D2受體親和力很高，但是125I-AIBZM脂溶性小，不易通過血腦屏障，從而限制

2、了該化合物作為腦顯像劑的應(yīng)用。
　　本課題目的在于通過以下兩種途徑，提高標(biāo)記化合物125I-AIBZM入腦量。
　　1結(jié)構(gòu)改造。對標(biāo)記化合物125I-AIBZM的標(biāo)記前體化合物(S)-N-(1-乙基-2-吡咯烷基)甲基-4-氨基-2-甲氧基苯甲酰胺(ABZM)進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造。通過化學(xué)合成，將化合物ABZM對位上氨基改造成二甲氨基，得到化合物(S)-4-二甲氨基-N-(1-乙基-2-吡咯烷基)甲基-2-甲氧基苯甲酰胺(DMABZ

3、M)，意在提高其脂溶性。采用Iodogen法對化合物DMABZM進(jìn)行放射性125I標(biāo)記，得到放射性標(biāo)記化合物125I-DMAIBZM，標(biāo)記率為74％，放化純度達(dá)99％。生物體內(nèi)分布實(shí)驗(yàn)，重點(diǎn)觀察放射性標(biāo)記化合物125I-DMAIBZM在小鼠、大鼠腦組織的分布。小鼠腦組織分布實(shí)驗(yàn)中，在紋狀體與小腦的分布比值可達(dá)6.5，說明125I-DMAIBZM在多巴胺D2受體含量豐富的紋狀體、海馬等組織有一定的滯留時(shí)間。在大鼠體內(nèi)分布實(shí)驗(yàn)中，125I-

4、DMAIBZM在大鼠腦組織的分布高于123I-AIBZM文獻(xiàn)報(bào)道值，但與臨床上常用的123I-IBZM還有一定差距。
　　2納米脂質(zhì)體載藥系統(tǒng)。采用乳鐵蛋白納米脂質(zhì)體載藥系統(tǒng)，將小分子放射性化合物125I-AIBZM主動靶向到腦，提高入腦量。125I-AIBZM的制備采用Iodogen法，標(biāo)記率99％。采用成膜水化法制備空白脂質(zhì)體(L)，水化后的脂質(zhì)體通過高壓均質(zhì)機(jī)(微型擠壓器)進(jìn)行過膜整粒，得到形狀規(guī)則、分布均勻、粒徑大小在10

5、0 nm左右的空白脂質(zhì)體，連接靶頭后得到乳鐵蛋白脂質(zhì)體(Lf-L)，透射電鏡觀察連接靶頭乳鐵蛋白前后，脂質(zhì)體性質(zhì)變化不明顯。載藥脂質(zhì)體的制備采用硫酸銨梯度主動載藥法。熱實(shí)驗(yàn)前，選用標(biāo)記前體化合物ABZM進(jìn)行載藥冷實(shí)驗(yàn)，證明化合物ABZM可通過硫酸銨梯度法主動包載到空白脂質(zhì)體中，并利用標(biāo)準(zhǔn)曲線法對ABZM-脂質(zhì)體進(jìn)行包封率測定，結(jié)果為20.42％。根據(jù)冷實(shí)驗(yàn)方法，對小分子放射性標(biāo)記化合物125I-AIBZM進(jìn)行主動載藥熱實(shí)驗(yàn)，包封率：12

6、5I-AIBZM-脂質(zhì)體(125-AIBZM-L)為39.29％。125I-AIBZM-Lf-脂質(zhì)體(125I-AIBZM-Lf-L)為35.2％。通過載藥脂質(zhì)體泄漏實(shí)驗(yàn)對其穩(wěn)定性進(jìn)行考察：125I-AIBZM-L、125I-AIBZM-Lf-L在pH=7.4的PBS溶液中，能穩(wěn)定存在較長時(shí)間(72 h泄漏百分率<10％)，而在pH=4.0的PBS溶液中，兩種載藥脂質(zhì)體能很快釋藥(2 h>60％)，這說明兩種脂質(zhì)體泄漏情況很相近，連接靶

7、頭乳鐵蛋白對載藥脂質(zhì)體穩(wěn)定性無明顯影響。對乳鐵蛋白脂質(zhì)體連接百分比測定采用凝膠電泳放射自顯影的方法，測量結(jié)果為80.2％。對Lf-L腦靶向性的驗(yàn)證，本課題實(shí)驗(yàn)將熒光素DIR包載到脂質(zhì)體中制備成DIR-脂質(zhì)體(DIR-L)、DIR-Lf-脂質(zhì)體(DIR-Lf-L)，進(jìn)行熒光活體成像，結(jié)果顯示DIR-Lf-L具有明顯的腦靶向性。藥動學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示125I-AIBZM-L與125I-AIBZM-Lf-L大鼠體內(nèi)血循環(huán)時(shí)間比125I-AIBZM明顯

8、延長，這利于125I-AIBZM-Lf-L腦靶向性的實(shí)現(xiàn)。最后進(jìn)行125I-AIBZM-Lf-L、125I-AIBZM-L、125I-AIBZM小鼠體內(nèi)分布實(shí)驗(yàn)，對各藥物同時(shí)相入腦量進(jìn)行比較，結(jié)果125I-AIBZM制備成脂質(zhì)體后入腦量有顯著提高，特別是125I-AIBZM-Lf-L，入腦量在0.5 h達(dá)到峰值，％ID/g為1.61，比同時(shí)相的125I-AIBZM-L(0.65)、125I-AIBZM(0.09)顯著增加。125I-AI