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文檔簡介
1、目的:通過正交試驗法驗證胡黃連苷Ⅱ?qū)Υ笫竽X缺血損傷的神經(jīng)保護(hù)作用并優(yōu)化其治療的最佳劑量及時間窗。
方法:應(yīng)用雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎法建立大鼠前腦缺血模型,按照正交試驗設(shè)計分組,經(jīng)腹腔注射胡黃連苷Ⅱ干預(yù)治療。甲苯胺藍(lán)染色法觀察神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu);流式細(xì)胞術(shù)觀察細(xì)胞早期凋亡率;免疫組織化學(xué)法和蛋白免疫印跡法(Western blot)定性、定量檢測神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)表達(dá);反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測NSE mRNA轉(zhuǎn)錄
2、水平。
結(jié)果:胡黃連苷Ⅱ治療大鼠腦缺血損傷的最佳時間和劑量:根據(jù)甲苯胺藍(lán)染色顯示為腦缺血2.0h腹腔注射胡黃連苷Ⅱ10mg/kg;流式細(xì)胞術(shù)檢測顯示為腦缺血1.5h腹腔注射胡黃連苷Ⅱ10mg/kg;免疫組織化學(xué)法分析為腦缺血2.0h腹腔注射10mg/kg;Western blot分析為腦缺血2.0h給予10mg/kg; RT-PCR顯示為腦缺血1.5h給予10mg/kg。
結(jié)論:根據(jù)用藥劑量最小化和治療時間窗最大化的
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