hBD-2體外抗菌免疫防御功能的研究.pdf

1、目的:
　　構建人鼻黏膜上皮細胞原代體外培養(yǎng)模型，評估hBD-2基因轉染人鼻黏膜原代上皮細胞培養(yǎng)產(chǎn)物蛋白質的體外抗菌活性，為進一步hBD-2在體內的免疫防御功能研究提供依據(jù)。
　　方法:
　　1.收集人下鼻甲黏膜，酶消化結合組織塊法體外培養(yǎng)人鼻黏膜上皮細胞，免疫組化鑒定結果;
　　2.脂質體Lipofectamine2000介導重組pIRE S2-Zsgreen1-hBD2質粒轉染人鼻黏膜上皮細胞，熒光顯微鏡、熒

2、光定量RT-PCR法檢測人鼻黏膜上皮細胞hBD-2表達;
　　3.收集細胞培養(yǎng)上清，用打孔法評價對鼻-鼻竇炎常見菌群的抗菌活性。
　　結果:
　　1.經(jīng)細胞角蛋白AE1/AE2免疫組化鑒定體外培養(yǎng)的人鼻黏膜原代細胞為上皮細胞，細胞陽性率達93.1％;
　　2.熒光顯微鏡檢測hBD-2轉染后的細胞表現(xiàn)出綠色熒光，轉染率約35％。熒光定量RT-PCR法檢測人鼻黏膜上皮細胞hBD-2mRNA表達升高;
　　3.轉