關(guān)于Dlicl基因在小鼠視網(wǎng)膜色素變性中的功能研究.pdf

1、視網(wǎng)膜色素變性(retinitis pigmentosa)是一種遺傳性的致盲疾病，是由于視網(wǎng)膜感光細(xì)胞(photoreceptor cell)死亡而導(dǎo)致的視力受損。目前已經(jīng)確定了50多個致病基因的突變位點，但尚無有效的預(yù)防和治療措施。發(fā)現(xiàn)新的致病基因并研究其在視網(wǎng)膜色素變性中的作用和機制將為臨床治療提供重要的理論基礎(chǔ)。
　　動力蛋白(dynein)是向微管負(fù)端運動的一類馬達(dá)蛋白，在細(xì)胞內(nèi)對于蛋白質(zhì)運輸、細(xì)胞器定位具有重要的作用。D

2、lic1基因編碼哺乳動物動力蛋白輕鏈中間鏈1，是動力蛋白中的一個亞基。通過建立Dlic1基因敲除小鼠，我們研究了該基因在小鼠中的功能。我們發(fā)現(xiàn)Dlic1-/-小鼠可以存活，但該小鼠的感光細(xì)胞內(nèi)外節(jié)發(fā)育不完全并且逐漸發(fā)生凋亡。利用該基因敲除小鼠我們進(jìn)一步研究了感光細(xì)胞發(fā)生凋亡的機制以及Dlic1在感光細(xì)胞中的功能。免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn)，在Dlic1-/-感光細(xì)胞內(nèi)合成的外節(jié)蛋白質(zhì)異位累積在胞體內(nèi)。蛋白質(zhì)從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到高爾基的運輸受阻礙，導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

3、網(wǎng)腔膨大，但是膨大的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)網(wǎng)腔并未激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)答反應(yīng)。Rab11囊泡介導(dǎo)蛋白質(zhì)從高爾基體運輸?shù)嚼w毛，Dlic1缺失導(dǎo)致Rab11囊泡積累在細(xì)胞核周圍的胞體中。這說明Dlic1-/-感光細(xì)胞中蛋白質(zhì)從高爾基體到纖毛的運輸受阻。
　　進(jìn)一步的研究表明，Dlic1基因缺失導(dǎo)致動力蛋白重鏈和中間鏈蛋白水平降低，并且在感光細(xì)胞內(nèi)節(jié)的含量減少，暗示了胞內(nèi)動力蛋白的運輸能力降低。同時，動力蛋白結(jié)合Rab11囊泡的能力被減弱，因此而導(dǎo)致Rab11

4、介導(dǎo)的囊泡不能有效運輸而發(fā)生累積。另外，Dlicl基因缺失影響了感光細(xì)胞纖毛發(fā)育。而纖毛是蛋白質(zhì)從內(nèi)節(jié)到外節(jié)運輸?shù)闹匾ǖ?，運輸通道的異常發(fā)育進(jìn)一步加劇了外節(jié)蛋白在胞體內(nèi)的累積。
　　根據(jù)以上的新發(fā)現(xiàn)我們得出結(jié)論，Dlic1敲除造成感光細(xì)胞動力蛋白減少和異常分布，一方面降低了動力蛋白運載囊泡的能力，使得高爾基到纖毛的囊泡運輸發(fā)生阻礙。另一方面影響了感光細(xì)胞纖毛發(fā)育異常。這兩方面共同作用，使得細(xì)胞合成的外節(jié)蛋白異位累積在胞體內(nèi)，造成