產(chǎn)前單、多療程地塞米松和沐舒坦對(duì)胎鼠肺SP-BmRNA、TTF-1表達(dá)的影響及機(jī)制的研究.pdf

1、目的：新生兒呼吸窘迫綜合征(NRDS)是新生兒期最常見(jiàn)的嚴(yán)重疾病，是新生兒早期死亡的重要原因之一，因此預(yù)防本病的發(fā)生和早期治療一直是國(guó)內(nèi)外學(xué)者的研究重點(diǎn)。甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子(TTF-1)是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的與肺成熟密切相關(guān)的因子，是一種細(xì)胞核蛋白，是Nkx2基因家族的同源核轉(zhuǎn)錄蛋白[1]，作為甲狀腺球蛋白和甲狀腺過(guò)氧化物酶基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子被發(fā)現(xiàn)。新近研究發(fā)現(xiàn)，TTF-1被認(rèn)為是肺發(fā)育中一種具有組織特異性的核轉(zhuǎn)錄因子，主要調(diào)控肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞(AE

2、CⅡ)內(nèi)肺泡表面活性蛋白(SP)SP基因的轉(zhuǎn)錄。Linda.W.Gonzales已通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)TTF-1的基因NKx2.1可以由地塞米松(Dex)所識(shí)別和觸發(fā)[2]。有關(guān)早產(chǎn)的動(dòng)物產(chǎn)前應(yīng)用Dex觀察對(duì)TTF-1及SP表達(dá)的影響，國(guó)內(nèi)外尚未有報(bào)道。研究發(fā)現(xiàn)，大劑量沐舒坦具有促進(jìn)內(nèi)源性PS的合成和分泌作用[3]，對(duì)應(yīng)用Dex有禁忌癥的孕婦產(chǎn)前應(yīng)用沐舒坦預(yù)防NRDS，國(guó)內(nèi)外少有報(bào)道。許多產(chǎn)科醫(yī)生主張對(duì)早產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)持續(xù)存在的孕婦進(jìn)行產(chǎn)前多療程D

3、ex治療[4]，與產(chǎn)前單療程Dex比較，前者的安全性和風(fēng)險(xiǎn)仍存在爭(zhēng)議。本研究通過(guò)建立早產(chǎn)鼠的動(dòng)物模型，取得藥物干預(yù)后的胎肺組織標(biāo)本，通過(guò)RT-PCR方法檢測(cè)胎鼠肺SP-BmRNA的表達(dá)、免疫組化方法檢測(cè)TTF-1蛋白的表達(dá)，觀察產(chǎn)前不同劑量、不同療程Dex和沐舒坦對(duì)SP-BmRNA、TTF-1蛋白表達(dá)和肺形態(tài)的影響，旨在探討(1)不同劑量、不同療程Dex和沐舒坦對(duì)SP-BmRNA表達(dá)、胎肺形態(tài)發(fā)育、肺重/體重的影響；(2)產(chǎn)前應(yīng)用Dex

4、和沐舒坦對(duì)胎鼠肺TTF-1蛋白表達(dá)的影響；(3)TTF-1在胎肺成熟中的作用以及Dex促進(jìn)肺成熟的確切作用和相關(guān)機(jī)制。以期為沐舒坦作為Dex的替代藥物應(yīng)用于臨床提供初步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)；為產(chǎn)前合理應(yīng)用Dex提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 結(jié)果：1.產(chǎn)前預(yù)防應(yīng)用Dex2程組、Dex1程組、沐舒坦組對(duì)肺形態(tài)發(fā)育的影響：與對(duì)照組相比，Dex2程組、Dex1程組、沐舒坦組肺形態(tài)發(fā)育較成熟，表現(xiàn)為肺泡腔增大且較規(guī)則，肺泡間隔較薄。經(jīng)圖像分析表明，Dex2程組、

5、Dex1程組、沐舒坦組的肺泡腔的表面積較對(duì)照組大，而肺泡間隔的表面積較對(duì)照組小，肺泡腔與肺泡間隔的表面積之比明顯大于對(duì)照組，差異有顯著性(P＜0.01)；Dex2程組大于Dex1程組，差異有顯著性(P＜0.01)；Dex1程組與沐舒坦組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 2.各組肺重/體重的比值的比較：Dex2程組肺重/體重較Dex1程組、沐舒坦組和對(duì)照組低，差異有顯著性(P＜0.01)；Dex1程組較沐舒坦組低，差異有顯著性(

6、P＜0.01)；沐舒坦組和對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 3.各組胎肺SP-BmRNA表達(dá)的比較：Dex2程組SP-BmRNA的表達(dá)較Dex1程組、沐舒坦組和對(duì)照組高，差異有顯著性(P＜0.01)；Dex1程組較對(duì)照組高，差異有顯著性(P＜0.01)；沐舒坦組較對(duì)照組高，差異有顯著性(P＜0.05)；Dex1程組與沐舒坦組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 4.各組胎肺TTF-1蛋白的表達(dá)的比較：(1)胞核內(nèi)出

7、現(xiàn)棕黃色顆粒沉著的肺泡上皮細(xì)胞為陽(yáng)性細(xì)胞，經(jīng)圖像分析測(cè)定，Dex2程組TTF-1的平均光密度值較Dex1程組高，差異有顯著性(P＜0.01)；Dex1程組TTF-1的平均光密度值較對(duì)照組高，差異有顯著性(P＜0.01)；沐舒坦組和生理鹽水對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；(2)Dex2程組、Dex1程組、對(duì)照組3組TTF-1的表達(dá)和SP-BmRNA的表達(dá)呈正相關(guān)(P＜0.05)。沐舒坦組TTF-1的表達(dá)和SP-BmRNA的表

8、達(dá)無(wú)相關(guān)關(guān)系(P＞0.05)。 結(jié)論：1.沐舒坦和Dex均可通過(guò)促進(jìn)胎肺的形態(tài)發(fā)育和SP-BmRNA的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)胎肺的結(jié)構(gòu)和功能成熟，且隨著Dex劑量的增加，作用更為明顯。 2.沐舒坦在促進(jìn)胎肺成熟方面與Dex1程組作用相似，且對(duì)胎肺重量無(wú)明顯影響，為沐舒坦作為糖皮質(zhì)激素的替代藥物應(yīng)用于臨床提供了初步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 3.產(chǎn)前多療程Dex治療雖然在胎肺成熟方面強(qiáng)于產(chǎn)前單療程Dex治療，但是肺重/體重的比值較低，表