

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1、目的:應(yīng)用SNP(單核苷酸多態(tài)性)基因芯片和免疫組化等實(shí)驗(yàn)方法探討乳腺癌中轉(zhuǎn)移相關(guān)基因差異表達(dá)和Ezrin基因蛋白過表達(dá)的臨床病理學(xué)意義。
材料:選取140例來自延邊腫瘤醫(yī)院病理科、上海同濟(jì)大學(xué)附屬第一婦嬰醫(yī)院病理科的乳腺病變組織存檔蠟塊標(biāo)本,其中,乳腺癌87例,乳腺原位癌(DCIS)33例,乳腺癌旁正常組織20例。此外,還選取了新鮮乳腺病變組織標(biāo)本12例,其中,乳腺癌8例(有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移各4例)、乳腺纖維瘤1例、
2、乳腺腺病1例和正常乳腺組織2例,均由延邊腫瘤醫(yī)院病理科提供。
方法:應(yīng)用SNP(單核苷酸多態(tài)性)基因芯片技術(shù)分析乳腺癌中20種轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的差異表達(dá)(拷貝數(shù)),同時(shí)應(yīng)用免疫組化EnVision法檢測(cè)Ezrin蛋白在乳腺癌、DCIS和乳腺癌旁正常組織中的表達(dá)水平,并分析其蛋白檢測(cè)的臨床病理學(xué)意義。
結(jié)果:SNP基因芯片檢測(cè)結(jié)果表明,與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌相比,在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性的乳腺癌中Ezrin、BRCA1、SDX4、
3、P27、NEDD9、TSC2、TPM3、 ST3、FLT4等9種轉(zhuǎn)移相關(guān)基因明顯擴(kuò)增,而RORB、EPHB2、HGF、MYCL1、BRCA2、SHH、PTEN、ESR1、TWIST1、NF2、HDNC1等11種轉(zhuǎn)移相關(guān)基因則明顯缺失。免疫組化檢測(cè)結(jié)果表明:Ezrin蛋白在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌中表達(dá)率明顯增高,陽性和強(qiáng)陽性表達(dá)率分別達(dá)100%(46/46)和89.1%(43/46);而在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌中的表達(dá)率則明顯下降,陽性和強(qiáng)陽
4、性表達(dá)率分別僅為73.2%(30/41)和31.7%%(13/41)(P<0.05)。另外,免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,Ezrin蛋白在癌旁正常組織中的陽性表達(dá)率較低,僅為10%(2/20),且主要表現(xiàn)為弱陽性,但在乳腺癌和DCIS中的陽性表達(dá)率則明顯升高,分別達(dá)87.4%(76/87)和87.9%(29/33),強(qiáng)陽性表達(dá)率分別達(dá)64.4%(56/87)和60.6%(20/33)(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn),Ezrin蛋白在正常乳腺組織中表
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