高遷移率族蛋白1放大脂多糖炎癥的胞內(nèi)信號機制研究.pdf

1、目的:研究HMGB1放大LPS誘導(dǎo)的炎癥效應(yīng)的機制。
　　方法:分別以100ng/mlLPS和100ng/mlLPS+100ng/mlHMGB1處理RAW264.7細胞,在0h、2h用免疫熒光法檢測的NF-KB的激活;用western-blotting法檢測刺激0min、15min、30min、60min后ikb-α、p-p38的水平,并檢測刺激0min、30min、60min后p-IRF3磷酸化的水平;用實時定量PCR(real

2、timePCR,RT-PCR)的方法檢測刺激0h、3h、6h后IL-6與IFN-βmRNA的轉(zhuǎn)錄水平。用P38MAPK抑制劑處理RAW264.7細胞,用RT-PCR檢測IL-6與IFN-βmRNA的轉(zhuǎn)錄水平,用western-blotting法檢測p-IRF3的磷酸化水平。
　　結(jié)果:1.HMGB1上調(diào)LPS誘導(dǎo)的巨噬細胞的IL-6及IFN-βmRNA的轉(zhuǎn)錄水平(P<0.05);
　　2.HMGB1對LPS誘導(dǎo)的巨噬細胞的i

3、kb-α的降解及NF-KB的激活無明顯影響(P>0.05);
　　3.HMGB1增加LPS誘導(dǎo)的巨噬細胞RAW264.7的P38MAPK及P-IRF3的表達量(P<0.05);
　　4.P38MAPK抑制劑下調(diào)LPS或LPS+HMGB1誘導(dǎo)的巨噬細胞的IL-6及IFN-βmRNA的轉(zhuǎn)錄水平;P38MAPK抑制劑降低LPS+HMGB1誘導(dǎo)的巨噬細胞的P-IRF3磷酸化的水平(P<0.05);
　　結(jié)論:高遷移率族蛋白(H