成纖維細(xì)胞與自體毛發(fā)角蛋白凝膠作為軟組織填充材料的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探索成纖維細(xì)胞與自體毛發(fā)角蛋白凝膠混合注射材料作為新型自體軟組織填充材料和蛋白修復(fù)系統(tǒng)的可行性，為臨床應(yīng)用奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 方法：采用兔真皮成纖維細(xì)胞和兔毛角蛋白凝膠，取6～7周齡裸鼠12只，將兔真皮成纖維細(xì)胞與自體毛發(fā)角蛋白凝膠混合材料注射到裸鼠(無胸腺鼠)背部皮膚，制作動(dòng)物皮膚軟組織填充實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，每只?dòng)物背部左側(cè)各取2個(gè)注射點(diǎn)作為實(shí)驗(yàn)組，對側(cè)相應(yīng)部位各取2個(gè)注射點(diǎn)作為對照組。實(shí)驗(yàn)組(FG組)：角蛋白凝膠與真皮成纖維細(xì)胞混

2、合組，含有5×10<'5>真皮成纖維細(xì)胞與200μl凝膠懸浮液；角蛋白凝膠對照組(G組)：含有200μl角蛋白凝膠；真皮成纖維細(xì)胞對照組(F組)：含有5×10<'5>真皮成纖維細(xì)胞。分別于注射體內(nèi)后第1，2，4，6，8，10，12周對注射區(qū)皮膚進(jìn)行大體觀察，注射區(qū)皮膚組織切片HE染色觀察皮膚形態(tài)學(xué)改變及真皮厚度測量、抗兔I型膠原蛋白免疫組織化學(xué)染色及Western-blot對兔Ⅰ型膠原蛋白進(jìn)行定量檢測。 結(jié)果：注射后不同時(shí)間點(diǎn)注

3、射區(qū)皮膚均無感染化膿及破潰；F組第1周后體積消失，F(xiàn)G組和G組注射區(qū)皮膚隆起體積隨時(shí)間延長逐漸減小，12周時(shí)FG組約為第1周的40％，G組皮膚隆起基本消失；相同時(shí)間段觀察真皮厚度示FG組>F組>G組；2周時(shí)FG組和F組Ⅰ型膠原蛋白抗體免疫組織化學(xué)染色呈強(qiáng)陽性，G組呈弱陽性，免疫組化圖像分析顯示FG組陽性密度大于F組；Western-blot抗兔Ⅰ型膠原蛋白定量檢測FG組>F組>G組；隨時(shí)間延長，F(xiàn)G組和F組Ⅰ型膠原蛋白蛋白含量明顯升高。