選擇性阻斷KIRs抑制性受體調(diào)節(jié)NK細(xì)胞殺傷功能的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、自然殺傷細(xì)胞(natural killer cells，NK cells)屬非特異性免疫細(xì)胞，是人體細(xì)胞免疫的重要組成部分。特別是對(duì)病毒及腫瘤細(xì)胞具有殺傷活性，而對(duì)宿主本身的正常細(xì)胞不具有殺傷作用。NK細(xì)胞主要通過(guò)對(duì)“自我”和“非我”的準(zhǔn)確識(shí)別發(fā)揮免疫保護(hù)作用。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞活化是通過(guò)其表面功能不同的受體發(fā)揮作用：(1)殺傷細(xì)胞活化受體；(2)殺傷細(xì)胞抑制受體。表面的殺傷抑制性受體(Killer cells inhibitory

2、 receptors，KIRs)是調(diào)節(jié)其殺傷活性的關(guān)鍵分子，為NK細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)受體。 目的：本課題初步探討NK細(xì)胞通過(guò)抑制性受體與配體之間的相容性調(diào)節(jié)其細(xì)胞殺傷活性調(diào)節(jié)的作用和機(jī)理；封閉NK細(xì)胞的抑制性受體KIRs對(duì)于腫瘤細(xì)胞的體外殺傷活性的影響。 方法：用單克隆抗體CD158a、CD158b封閉處理NK-92MI細(xì)胞后，與體外培養(yǎng)的K562細(xì)胞(NK細(xì)胞敏感細(xì)胞株)及Raji細(xì)胞(NK細(xì)胞不敏感細(xì)胞株)按不同的效靶比混合

3、共同孵育。效靶比分別為5：1、10：1、20：1。同時(shí)每組效靶細(xì)胞均加設(shè)不使用CD158a、CD158b抗體封閉的對(duì)照組。應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同效靶比情況下NK-92MI細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的體外殺傷活性。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)所得，共同孵育4小時(shí)后的殺傷結(jié)果為最佳。NK-92MI殺傷作用隨效靶比的增高而增強(qiáng)。經(jīng)單克隆抗體CD158處理過(guò)的NK-92MI對(duì)K562和Raji細(xì)胞的殺傷活性均高于不應(yīng)用單克隆抗體CD158處理過(guò)的對(duì)照組，且差異顯著(