MS-275選擇性殺傷MKN-45細(xì)胞生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:胃癌是我國(guó)消化系統(tǒng)常見(jiàn)高發(fā)惡性腫瘤,居癌癥死亡率的第二位。手術(shù)對(duì)早期胃癌有較好的療效,但對(duì)中晚期的胃癌療效欠佳?；熀头暖煂?duì)胃癌有效率均較低,只能作為輔助治療,因此尋找更有效的治療手段仍是目前胃癌研究的重點(diǎn)之一。近年研究表明組蛋白乙?；腿ヒ阴；c腫瘤的發(fā)生密切相關(guān),去乙?；D(zhuǎn)移酶抑制劑(histone deacetylase inhibitors,HDACIs)對(duì)多種腫瘤細(xì)胞有明顯的抑制作用并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,但是否會(huì)選擇性殺傷

2、胃癌細(xì)胞而不殺傷正常細(xì)胞,目前尚不清楚。故此,我們?cè)O(shè)計(jì)本實(shí)驗(yàn)以胃癌細(xì)胞MKN-45、正常胃粘膜細(xì)胞GES-1、張氏肝細(xì)胞CHANGLIVER為研究對(duì)象初步探討去乙酰化轉(zhuǎn)移酶抑制劑MS-275體外抑制胃癌細(xì)胞MKN-45的作用及相關(guān)的分子機(jī)制。
　　研究方法:1)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線:用不同濃度的MS-275處理MKN-45細(xì)胞及CHANGLIVER和GES-1細(xì)胞,利用WST-1方法研究MS-275處理細(xì)胞后的生長(zhǎng)情況。2)凋亡檢測(cè):采用

3、流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,FCM)及TUNEL(terminaldeoxynucleotidyl trasferase-mediated end labeling)檢測(cè)MS-275處理后胃癌細(xì)胞和正常細(xì)胞的凋亡變化。3)通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的DNA含量來(lái)研究MS-275處理胃癌細(xì)胞后細(xì)胞周期發(fā)生的變化。4)利用caspase廣譜抑制劑結(jié)合流式細(xì)胞儀分析caspase在胃癌細(xì)胞MKN-45凋亡機(jī)制中的作用。5) Wes

4、tern Blot檢測(cè)MS-275對(duì)胃癌細(xì)胞促凋亡基因bax、細(xì)胞周期抑制基因p21蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:1)去乙?；D(zhuǎn)移酶抑制劑MS-275可明顯抑制胃癌細(xì)胞MKN-45的生長(zhǎng),且呈時(shí)間和劑量依賴性,但對(duì)正常胃粘膜細(xì)胞GES-1及張氏肝細(xì)胞CHANGLIVER沒(méi)有明顯的生長(zhǎng)抑制作用。2) MS-275可明顯誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞MKN-45細(xì)胞凋亡,但對(duì)正常胃粘膜細(xì)胞GES-1及張氏肝細(xì)胞CHANGLIVER并不表現(xiàn)出促凋亡作用。3

5、) MS-275可以使胃癌細(xì)胞MKN-45周期停滯于G0/G1期。4) Caspase廣譜抑制劑可明顯抑制MS-275對(duì)胃癌細(xì)胞的凋亡作用,說(shuō)明MS-275誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡是caspase依賴性的。5) Western Blot結(jié)果表明MS-275可增加促凋亡基因bax、細(xì)胞周期抑制基因p21的表達(dá)。
　　結(jié)論:去乙?；D(zhuǎn)移酶抑制劑MS-275可明顯抑制胃癌細(xì)胞MKN-45的生長(zhǎng)并誘導(dǎo)其凋亡,主要作用是通過(guò)調(diào)控一些腫瘤相關(guān)基因,但不