DmMAGE、Dmp53與一種新的果蠅蛋白CG13142相互作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、自1991年Van der Bruggen等人首次發(fā)現MAGE—1抗原以來，在人類細胞中已發(fā)現25個MAGE同源基因。目前關于MAGE蛋白在腫瘤特異性免疫治療方面已進行了大量的研究，但對于該蛋白家族在正常生命活動中的功能依然知之甚少。 根據果蠅蛋白相互作用數據庫分析結果，我們克隆并鑒定了果蠅DmMage及與其相互作用的基因CG13142。通過制備針對這兩種蛋白的多克隆抗體，分別檢測了這兩個基因在果蠅發(fā)育中的表達水平、組織學分

2、布及其細胞定位。結果表明：果蠅DmMage基因在正常組織中(尤其是神經系統(tǒng))表達，其主要分布在胞漿中；CG13142不僅分布在胞質中，在核內亦可檢測到呈散在不均一分布，未見與染色質DNA共定位，在胚胎發(fā)育后期主要存在于花環(huán)細胞(garland cell)中，成蟲盤、蛹及成蟲中均有低水平表達。 為了了解這兩個基因的在體功能，我們分別構建了DmMage及CG13142基因的過表達轉基因果蠅。在與各種全身性或組織特異性表達的GAL

3、4果蠅雜交后，并未發(fā)現明顯的表型變化。但是當這兩株果蠅分別與LJAS—Dmp53共同驅動后，發(fā)現它們可以不同程度地挽救Dmp53的致死效應。在Dmp53缺陷的果蠅中CG13142蛋白的表達量明顯升高：而當Dmp53過量表達時，CG13142的蛋白量則有所下降。GST pull down實驗以及免疫共沉淀實驗則顯示CG13142可以與Dmp53發(fā)生直接相互作用。提示：CG13142的過表達可以部分抑制Dmp53的過表達效應，其本身可能也受

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