BOLD fMRI技術(shù)結(jié)合非血流動(dòng)力學(xué)響應(yīng)函數(shù)分析法檢測(cè)大鼠C6皮下膠質(zhì)瘤內(nèi)部氧合變化的可行性研究.pdf

1、文章主要從以下幾方面進(jìn)行了論述。
　　第一部分 大鼠C6皮下膠質(zhì)瘤模型的構(gòu)建及病理觀察
　　目的:通過(guò)比較細(xì)胞懸液接種法及瘤組織塊接種法構(gòu)建的C6皮下膠質(zhì)瘤模型的成瘤率及生長(zhǎng)規(guī)律,選擇適用于第二部分實(shí)驗(yàn)的最優(yōu)動(dòng)物模型構(gòu)建方法。
　　方法:將21只Wistar大鼠分成兩組。第一組的11只大鼠均采用細(xì)胞懸液接種法種植腫瘤。隨機(jī)選取其中的一只腫瘤作為瘤組織塊來(lái)源,給予第二組的10只大鼠瘤組織塊法種植腫瘤。比較接種后不同時(shí)間點(diǎn)

2、兩組(各10個(gè))瘤體的最大徑及相對(duì)體積的差異并分析腫瘤的生長(zhǎng)趨勢(shì)。比較兩組(各10個(gè))成瘤潛伏期及成瘤率的差異。所有腫瘤均于接種后第21天取材觀察大體標(biāo)本。隨后腫瘤標(biāo)本制作成HE染色切片,在光學(xué)顯微鏡下觀察其病理特點(diǎn)。
　　結(jié)果:1.第一組腫瘤瘤體的最大徑于接種后第14天開(kāi)始顯著大于第二組(t=2.65,P=0.02);于第16天開(kāi)始,第一組腫瘤的相對(duì)體積也顯著大于第二組(t=2.35,P=0.03)。2.隨著瘤齡的增長(zhǎng),兩組腫瘤

3、的最大徑均呈線性趨勢(shì)增大(第一組Pearson r=0.99,R2=0.99,P=0.00;第二組Pearson r=1.00,R2=1.00,P=0.00),而兩組腫瘤的相對(duì)體積則均呈指數(shù)規(guī)律增大(第一組:Pearson r=0.98,R2=0.92,P=0.00;第二組:Pearson r=0.97,R2=0.95,P=0.00)。3.第一組的成瘤率達(dá)100％,潛伏期為8.45±0.69天;第二組則分別為60％、9.83±1.72天

4、。4. C6皮下膠質(zhì)瘤的HE染色病理特征與文獻(xiàn)報(bào)道的大鼠腦膠質(zhì)瘤的病理特征相符。
　　結(jié)論:大鼠C6膠質(zhì)瘤皮下種植瘤模型制作較簡(jiǎn)單,細(xì)胞懸液接種法較瘤組織塊接種法構(gòu)建的模型成瘤率高、生長(zhǎng)速度快、模型更加穩(wěn)定,是一種較為理想的膠質(zhì)瘤動(dòng)物模型。
　　第二部 分采用血氧水平依賴功能磁共振成像技術(shù)評(píng)價(jià)Carbogen吸入后大鼠皮下C6膠質(zhì)瘤氧合變化與腫瘤新生血管的相關(guān)性
　　目的:探討血氧水平依賴功能磁共振成像(BOLD fM

5、RI)技術(shù)結(jié)合非血流動(dòng)力學(xué)響應(yīng)函數(shù)(non-HRF)分析后處理算法檢測(cè)大鼠皮下C6膠質(zhì)瘤瘤體內(nèi)氧合變化狀況的可行性及應(yīng)用價(jià)值。
　　方法:1.20只雄性Wistar大鼠,采用細(xì)胞懸液法構(gòu)建C6皮下膠質(zhì)瘤模型。2.采用1.5TAchieva Dual超導(dǎo)型磁共振成像系統(tǒng)和Micro-47顯微線圈,對(duì)荷瘤鼠進(jìn)行磁共振掃描。對(duì)采集的功能圖像數(shù)據(jù)行non-HRF后處理分析,生成“氧合地圖”及“氧合幅度圖”。參照這兩幅統(tǒng)計(jì)參數(shù)圖,分別在“發(fā)

6、生顯著氧合改變且氧合變化幅度最大的區(qū)域”、“發(fā)生顯著氧合改變但氧合變化幅度一般的區(qū)域”、“未發(fā)生顯著氧合的區(qū)域”分別定義直徑為5mm的等大的三類感興趣區(qū)(ROI):ROImax、ROInon-max及ROInone,測(cè)量各ROI內(nèi)的氧合改變顯著性參數(shù)(T值)、BOLD信號(hào)強(qiáng)度變化率(PSC值)、強(qiáng)化程度百分率(ΔSI值)。3.根據(jù)瘤體表面標(biāo)記,制作與影像掃描方位一致的腫瘤石蠟切片,行HE染色及CD105免疫組織化學(xué)染色。對(duì)照同層面的影像

7、資料圖,在CD105免疫組織化學(xué)染色切片上標(biāo)記出上述ROI的位置。在顯微鏡下對(duì)上述ROI區(qū)域內(nèi)進(jìn)行微血管數(shù)目(MVN)計(jì)數(shù)。4.比較不同類型ROI內(nèi)測(cè)得的T值、PSC值及ΔSI值的差異。對(duì)ROImax及ROInon-max區(qū)測(cè)得的T值、PSC值、ΔSI值、MVN進(jìn)行兩兩之間的相關(guān)性分析。
　　結(jié)果:1.腫瘤的成瘤率達(dá)100％。2.獲得的“氧合地圖”及“氧合幅度圖”可與任意解剖圖像疊加。前者反映可發(fā)生再氧合區(qū)域的位置,后者反映各區(qū)域

8、的氧合變化程度。3.根據(jù)統(tǒng)計(jì)參數(shù)圖定義的所有ROImax區(qū)及大部分ROInon-max(57/60)區(qū)均位于病理檢查證實(shí)的腫瘤實(shí)質(zhì)區(qū)內(nèi),其平均BOLD信號(hào)強(qiáng)度于Carbogen氣體吸入后逐漸上升,達(dá)到一定程度后趨于平緩。ROInone及少數(shù)ROInon-max(3/60)區(qū)均位于病理檢查證實(shí)的腫瘤壞死區(qū)內(nèi),其平均BOLD信號(hào)強(qiáng)度在Carbogen吸入前及吸入后無(wú)明顯趨勢(shì)性改變。4.ROInone區(qū)測(cè)得的T值、PSC值及ΔSI值較ROIm

9、ax區(qū)均顯著降低(t=4.33,P=0.00;Mann-Whitney U=15.50,P=0.00;t=5.06,P=0.00);同時(shí)較ROInon-max區(qū)也顯著降低(Mann-Whitney U=214.00,P=0.00;Mann-Whitney U=131.00,P=0.00;Mann-Whitney U=122.50,P=0.00)。5.ROImax區(qū)測(cè)得的PSC值與MVN呈正相關(guān)(Pearson r=0.59,P=0.01