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文檔簡介
1、目的:
研究黃芪甲苷對人膝骨關(guān)節(jié)炎退變關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)金屬蛋白酶-1、3(MMP-1、MMP-3)表達的影響。
方法:
取人手術(shù)后的退變膝關(guān)節(jié)軟骨,進行細(xì)胞培養(yǎng),將培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞分離傳代后,取第三代細(xì)胞,通過HE、Ⅱ型膠原免疫熒光染色進行軟骨細(xì)胞鑒定,并進行MMP-1、MMP-3免疫熒光染色觀察軟骨細(xì)胞退變情況后分為六組(A組:軟骨細(xì)胞+DMEM對照組;B組:軟骨細(xì)胞+25mmol/L黃芪甲苷;C組
2、:軟骨細(xì)胞+50mmol/L黃芪甲苷;D組:軟骨細(xì)胞+75mmol/L黃芪甲苷;E組:軟骨細(xì)胞+100mmol/L黃芪甲苷;F組:軟骨細(xì)胞+500mmol/L黃芪甲苷),取4h、8h、24h、48h、72h采用實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerasechainreaction,PCR)檢測各組退變軟骨內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶-1、3(MMP-1、MMP-3)表達mRNA的表達情況。
結(jié)果:
培養(yǎng)的細(xì)胞為退變的
3、軟骨細(xì)胞,實時熒光定量PCR結(jié)果顯示,不同濃度黃芪甲苷有下調(diào)退變膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞MMP-1、MMP-3的作用,且50mmol/L黃芪甲苷在24h時對MMP-1、MMP-3的下調(diào)作用最好;在24h、48h、72h不同濃度(25-100mmol/L)黃芪甲苷膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞MMP-1、MMP-3表達量低于對照組(P<0.01),在24h時MMP-1、MMP-3的表達量最低。
結(jié)論:
黃芪甲苷可通過抑制退變軟骨細(xì)胞合成
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