原發(fā)性膽汁性肝硬化發(fā)病機(jī)制和生物標(biāo)志物的研究.pdf

1、目的：利用基因芯片技術(shù)找出原發(fā)性膽汁性肝硬化(primary biliarycirrhosis，PBC)患者中差異表達(dá)的基因，并進(jìn)行生物學(xué)水平的驗(yàn)證，從而為疾病診斷、治療以及明確病因提供幫助。
　　 方法：收集PBC患者和健康對(duì)照各9例，采集外周靜脈血，提取外周血單個(gè)核細(xì)胞總RNA，進(jìn)行人類(lèi)全基因組表達(dá)譜芯片(22K，約22000個(gè)基因)檢測(cè)，找出PBC中差異表達(dá)的基因。進(jìn)一步用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)并擴(kuò)大樣本量對(duì)篩選結(jié)果作生物學(xué)水

2、平驗(yàn)證。
　　 結(jié)果：基因芯片共篩選出65個(gè)在PBC中差異表達(dá)的基因，其中20個(gè)表達(dá)上調(diào)，45個(gè)表達(dá)下調(diào)。從篩選結(jié)果中選出位于NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒通路上的兩個(gè)重要基因PRF1、TYROBP進(jìn)行驗(yàn)證。發(fā)現(xiàn)PRF1在PBC早期或非活動(dòng)期表達(dá)上調(diào)，TYROBP在PBC中表達(dá)下調(diào)。
　　 結(jié)論：基因芯片為探索PBC的發(fā)病機(jī)制提供了方向，NK細(xì)胞對(duì)PBC的啟動(dòng)和維持可能發(fā)揮重要作用，PBMC中PRF1的表達(dá)水平可以成為判斷疾病進(jìn)展