化肝通絡方對原發(fā)性膽汁性肝硬化治療作用及機制研究.pdf

1、目的:建立膽汁淤積性肝硬化大鼠模型，測定大鼠的血清肝功能指標、血清α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體（TIMP-1）、細胞間粘附分子(ICAM-1)的表達，檢測肝臟組織中NFκB、TGF-β1、Smad3、Smad7的表達，評價化肝通絡方的療效并探討其作用機制。
　　方法:72只SD雄性大鼠，利用結(jié)扎大鼠膽總管制造大鼠膽汁淤積肝硬化模型，隨機分為6組，模型組，化肝通絡方低劑量組、化肝通絡方中劑量組、化

2、肝通絡方高劑量組、熊去氧膽酸(Ursodeoxycholic Acid UDCA)組、假手術(shù)組，于造后第5周開始給藥，化肝通絡方低、中、高劑量組分別給予小、中、大(1.09g/kg/d、2.18g/kg/d、4.36g/kg/d)劑量中藥湯劑灌胃; UDCA組給予58.3mg/kg/d混濁液灌胃;假手術(shù)組與模型組同時給予同體積蒸餾水灌胃，每日1次，連續(xù)4周。末次給藥后24h，取血，處死大鼠，(1)取血清測谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶

3、(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)等肝功能指標;(2)取部分肝臟行HE染色觀察肝臟病理形態(tài)變化;(3)大鼠血清酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)測定血清α-SMA、TIMP-1、ICAM-1(4)大鼠部分肝組織Real-time PCR(RT-PCR)測定NFκB、轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth factor TGF-β1)、TIMP-1、ICAM

4、-1的表達;(5)肝組織免疫組化測TGF-β1、Smad3、Smad7;
　　結(jié)果:(1)模型組與假手術(shù)組相比，模型組大鼠血清TBil、DBil、ALT、AST等肝功能指標明顯升高，并且血清中α-SMA、TIMP-1、ICAM-1高表達（P＜0.01或P＜0.05），模型組大鼠肝臟出現(xiàn)炎性細胞活動及纖維組織增生等病理改變;(2)化肝通絡方各組及UDCA組與模型組比較，血清肝功能指標ALT、AST、TBil、DBil明顯降低、各項肝

5、纖維化化指標α-SMA、TIMP-1、ICAM-1均有明顯下降（P＜0.01或P＜0.05），同時化肝通絡方能夠降低模型大鼠肝組織中TGF-β1、Smad3蛋白的表達，并能夠升高Smad7的表達(P＜0.05);(3)化肝通絡方各組與UDCA組比較，化肝通絡方高劑量組血清指標(P＞0.05)無顯著差異，中低劑量組(P＜0.05)，存在顯著差異。
　　結(jié)論:(1)化肝通絡方對于膽汁淤積性肝硬化動物模型具有明顯改善肝功能和緩解肝硬化的